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生活感悟短語(yǔ)范文第1篇

【摘要】

目的 ：探討乙肝表面抗原-CD40L胞外段融合蛋白設(shè)計(jì)的合理性。方法:應(yīng)用Gene Construction kit 2.5、DNAStar軟件和expasy.org網(wǎng)站提供的分析方案分析重組體的開(kāi)放讀框以及融合蛋白的柔性、親水性、抗原性、表位等性質(zhì)，并作了二級(jí)結(jié)構(gòu)模擬分析。結(jié)果:重組體CMV啟動(dòng)子下游有完整的目的基因ORF，融合蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)水平未出現(xiàn)新的抗原性及表位，親水性無(wú)改變，Linker部位抗原性低，呈中性且柔性高，不影響兩端的蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)及融合蛋白空間構(gòu)象。結(jié)論:重組體設(shè)計(jì)合理，融合蛋白很大可能保留了乙肝表面抗原和CD40L胞外段的生物學(xué)活性，為進(jìn)一步研究提供了理論依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】 乙型肝炎病毒表面抗原 CD40配體 分子結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)

Abstract: Objective: To explore the reasonability of the design of HBsAg-ecdCD40L fusion protein. Methods: Using sequence analysis software and protocols prescribed on website expasy.com the open reading frame of the recombinant plasmid and the flexibility，hydrophilicity，antigenicity and epitope of recombinant HBsAg-ecdCD40L were analyzed and the secondary structure of HBsAg-ecdCD40L fusion protein was analyzed，too. Results: The fusion protein had correct domains of HBsAg and ecdCD40L. The linker had low antigencity and high flexibility and might not influence the secondary structure of the fusion protein. Conclusion: The design of the fusion protein is reasonable. It Keeps the maximum biological activities of HBsAg and ecdCD40L.

Key words: hepatitis B surface antigens；CD40 ligand；molecular structure prediction

目前，乙肝治療性疫苗的研究多是在乙肝表面抗原（HBsAg）基礎(chǔ)上進(jìn)行改造，提高HBsAg的免疫原性是關(guān)鍵，融合適當(dāng)?shù)拿庖哒{(diào)節(jié)因子是有效方法之一。CD40L胞外段（ecdCD40L）能與DC表面CD40分子結(jié)合，促進(jìn)DC成熟，誘導(dǎo)特異性免疫反應(yīng)，與HBsAg融合后有望提高其免疫原性。在本實(shí)驗(yàn)中，我們?cè)O(shè)計(jì)了HBV S-ecdCD40L融合基因，重組基因能否有效轉(zhuǎn)錄、表達(dá)融合蛋白，融合蛋白能否保持原有的生物活性對(duì)進(jìn)一步的研究至關(guān)重要，為此，我們利用核酸、蛋白質(zhì)分析軟件以及互聯(lián)網(wǎng)上提供的方案，分析重組體的開(kāi)放讀框及融合蛋白的生物活性，預(yù)測(cè)融合蛋白設(shè)計(jì)的合理性。

1 材料和方法

1.1 材料 ayw亞型HBV S基因序列（GeneBank編號(hào)AF280817），人CD40L胞外段基因序列（GeneralBank編號(hào)NM_000074），pcDNA3.1質(zhì)粒序列，連接鏈（Linker）氨基酸序列為GGGGSGGGGSGGGGS。

1.2 引物設(shè)計(jì) 為避免融合蛋白中HBsAg、CD40L胞外段兩個(gè)肽段互相干擾，改變兩者的性質(zhì)功能，在兩個(gè)基因間設(shè)計(jì)一段Linker，將HBV S基因與CD40L胞外段基因序列相連，根據(jù)GeneBank中HBV S基因、CD40L基因序列以及Linker的編碼序列進(jìn)行引物設(shè)計(jì)，并引入酶切位點(diǎn)（下劃線）。HBV S基因引物順序?yàn)樯嫌危⊿F）：5’-GCGGGTACCATGGA

GAACATCACATCAGGATTC-3’，引入了Kpn I酶切位點(diǎn)，下游（SR）：5’-GGAGAATTCCACCGCCCGAGCCA CCGCCACCAATGTATACCCAAAGACAAAAGAAAAT-3’，引入了EcoR I 酶切位點(diǎn)以及Linker上半段。CD40L胞外段引物順序?yàn)樯嫌危–D40LF）：5’-TTAGAATTCG TGGGTCGGGTGGCGGCGGATCTCTTCATAGAAGGTTGGACAAG ATAGAA-3’，引入了EcoR I酶切位點(diǎn)以及Linker下半段，下游（CD40LR）：5’-GCGCTCGAGTCAGA GTTTGAGTAAGCCAAAGGA-3’，引入了Xho I酶切位點(diǎn)。

1.3 pcDNA3.1-S-ecdCD40L真核表達(dá)載體的構(gòu)建和軟件分析模擬

1.3.1 pcDNA3.1-S-ecdCD40L真核表達(dá)載體的構(gòu)建：PCR擴(kuò)增得到S基因、CD40L胞外段基因后，兩者經(jīng)EcoR I酶切連接，連接后以SF和CD40LR為上下游引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，獲得HBV S-ecdCD40L融合基因。融合基因通過(guò)Kpn I和Xho I雙酶切與pcDNA 3.1(+)進(jìn)行連接，所得重組體稱(chēng)為pcDNA3.1-S-ecdCD40L，表達(dá)融合蛋白稱(chēng)為乙肝表面抗原-CD40L胞外段融合蛋白(HBsAg-ecdCD40L)。

1.3.2 重組體讀框分析：Gene Construction kit 2.5軟件分析，起始密碼子為ATG，終止密碼子為T(mén)GA。

1.3.3 融合蛋白理化性質(zhì)分析：應(yīng)用expasy.org網(wǎng)站提供的ProtParam方案以及DNAStar軟件中的Protean程序進(jìn)行分析。

1.3.4 柔性分析：應(yīng)用expasy.org網(wǎng)站提供的Protscale方案以及Protean程序進(jìn)行分析，將HBsAg、CD40L胞外段及融合蛋白序列分別輸入，以9個(gè)氨基酸為一組進(jìn)行分析，將結(jié)果進(jìn)行比較。

1.3.5 抗原性分析：應(yīng)用Protean程序進(jìn)行分析。

1.3.6 表位分析：應(yīng)用Protean程序進(jìn)行分析。

1.3.7 二級(jí)結(jié)構(gòu)分析：應(yīng)用expasy.org網(wǎng)站提供的HNN方案進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

2.1 重組體作圖及讀框分析結(jié)果 將HBV S-ecdCD40L融合基因插入pcDNA3.1(+)真核表達(dá)載體多克隆位點(diǎn)，經(jīng)讀框（ORF）分析證實(shí)CMV啟動(dòng)子下游有完整的目的基因ORF（見(jiàn)圖1）。

2.2 理化性質(zhì)分析結(jié)果 ProtParam分析顯示融合蛋白分子量：50813.7 Da，等電點(diǎn)：8.46，負(fù)電荷殘基總數(shù)(Asp+Glu)：28，正電荷殘基總數(shù)(Arg+Lys)：34，分子式:C2304H3541N593O646S29，半衰期：30 h（哺乳動(dòng)物），不穩(wěn)定系數(shù)[The insta-bility index(II)]：51.23，該蛋白分類(lèi)為不穩(wěn)定蛋白。Protean軟件分析可知，HBsAg-ecdCD40L與HBsAg、ecdCD40L比較，各自的親水性無(wú)改變，同時(shí)Linker部位呈中性，說(shuō)明兩個(gè)基因連接之后的親水性和疏水性未受影響（見(jiàn)圖3）。

2.3 柔性分析結(jié)果 柔性區(qū)的存在可使兩側(cè)的蛋白功能區(qū)正確的折疊，從而產(chǎn)生正確的生物結(jié)構(gòu)和空間構(gòu)象。經(jīng)分析證實(shí)227到243位氨基酸（linker所在部位）存在高柔性區(qū)，連接鏈兩側(cè)的柔性區(qū)未發(fā)生改變，說(shuō)明模擬表達(dá)的HBsAg和ecdCD40L由柔性肽連接，伸展性大，可自由活動(dòng)，能發(fā)揮各自的生物學(xué)效能（見(jiàn)圖2、圖3）。

2.4 抗原性分析結(jié)果 融合基因表達(dá)后新接入的Linker部位不應(yīng)該產(chǎn)生新的抗原性，而且Linker兩側(cè)的抗原性不應(yīng)發(fā)生改變，HBsAg-ecdCD40L的氨基酸序列經(jīng)軟件分析并與HBsAg及ecdCD40L氨基酸序列的分析結(jié)果進(jìn)行比較，結(jié)果顯示Linker部位抗原性低，Linker兩側(cè)序列的抗原性未發(fā)生改變（見(jiàn)圖3）。

2.5 表位分析結(jié)果 軟件分析HBsAg-ecdCD40L的表位特征并與HBsAg以及ecdCD40L的表位特征比較，結(jié)果顯示HBsAg-ecdCD40L具有原來(lái)各自的表位特征，無(wú)新表位出現(xiàn)，Linker部位（227～243位氨基酸）表位值低，說(shuō)明HBsAg和ecdCD40L連接后相互之間幾乎沒(méi)有影響，沒(méi)有新的表位出現(xiàn)（見(jiàn)圖3）。

2.6 二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)結(jié)果 利用HNN方案預(yù)測(cè)HBsAg-ecdCD40L融合蛋白的結(jié)構(gòu)，提示其二級(jí)結(jié)構(gòu)由Alpha helix(Hh): 38.78%，Extended strand (Ee): 14.16%，Random coil (Cc)：47.06%構(gòu)成，linker所在部位基本為無(wú)規(guī)則卷曲，不影響兩側(cè)HBsAg和ecdCD40L的結(jié)構(gòu)（見(jiàn)圖4）。

3 討論

乙型病毒性肝炎是世界范圍內(nèi)廣泛傳播的傳染性疾病，近幾年的研究表明乙型肝炎病毒（HBV）感染的控制和清除有賴(lài)于機(jī)體的免疫系統(tǒng)， 其感染慢性化與機(jī)體針對(duì)HBV的特異性免疫， 尤其是細(xì)胞免疫的缺陷或低下有關(guān)。DC是體內(nèi)功能最強(qiáng)的專(zhuān)職抗原遞呈細(xì)胞，能攝取、加工并遞呈抗原，刺激未致敏T細(xì)胞的增殖和活化從而啟動(dòng)機(jī)體的特異性免疫應(yīng)答。研究顯示，慢性乙型肝炎患者存在DC功能缺陷，誘導(dǎo)HBV特異性T細(xì)胞反應(yīng)能力受損，無(wú)法有效清除病毒，是HBV免疫逃逸機(jī)制之一[1]，因此，改善DC功能，誘導(dǎo)和增強(qiáng)機(jī)體HBV特異性免疫的治療方法有望取得良好的抗病毒效果。

CD40L屬TNF超家族成員，是一種II型跨膜糖蛋白，是參與機(jī)體特異性細(xì)胞免疫應(yīng)答和體液免疫應(yīng)答的重要免疫共刺激分子，能與表達(dá)于DC表面的CD40分子相互作用，調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)。經(jīng)CD40L刺激后的DC具有如下特性：①抗原遞呈能力增強(qiáng)；②具有較強(qiáng)的T淋巴細(xì)胞趨化能力；③體外刺激T淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)能力增強(qiáng)；④表面的共刺激分子（CD80、CD86等）明顯上調(diào)，并能夠產(chǎn)生較高水平的IL-12，IFN-γ，TNF-α等細(xì)胞因子，促使Th0向Th1分化[2]。研究顯示，將HPV E7基因與CD40L胞外段基因融合構(gòu)建HPV E7-CD40L重組腺病毒，將其導(dǎo)入骨髓來(lái)源的DC，24 h及48 h后，E7-CD40L載體轉(zhuǎn)染的DC分泌IL-12，IFN-γ的水平明顯高于轉(zhuǎn)染E7載體、GFP-CD40L載體、磷酸鹽緩沖液(PBS)的對(duì)照組，而且E7-CD40L載體免疫小鼠能通過(guò)活化CD8+T細(xì)胞殺傷腫瘤細(xì)胞，抑制E7+腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)[3]，說(shuō)明E7-CD40L載體表達(dá)的融合蛋白對(duì)DC具有明顯刺激作用且，CD40L與腫瘤抗原融合后可誘導(dǎo)強(qiáng)大的腫瘤抗原特異性T細(xì)胞免疫。基于上述研究基礎(chǔ)，我們擬在傳統(tǒng)乙肝疫苗廣泛使用的HBsAg基礎(chǔ)上，融合CD40L胞外段，增強(qiáng)HBsAg的免疫原性，誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生更強(qiáng)的HBsAg特異性T細(xì)胞免疫應(yīng)答，為新型乙肝治療性疫苗的研究奠定基礎(chǔ)。

獲得融合蛋白首先要有科學(xué)的設(shè)計(jì)，并對(duì)其空間結(jié)構(gòu)和性質(zhì)有較準(zhǔn)確的預(yù)測(cè)，而對(duì)于新的基因及蛋白，應(yīng)用生物信息學(xué)技術(shù)進(jìn)行分析，是了解其性質(zhì)、功能的一種有效方法，可為進(jìn)一步研究奠定基礎(chǔ)，使其得到廣泛應(yīng)用[4-5]。我們計(jì)劃構(gòu)建pcDNA3.1-S-ecdCD40L重組表達(dá)載體，表達(dá)HBsAg和ecdCD40L融合蛋白，經(jīng)讀框分析證實(shí)，讀碼框與設(shè)計(jì)一致，利用軟件及互聯(lián)網(wǎng)上提供方案比較分析證實(shí)連接后產(chǎn)物親水性、柔性、抗原性、表位、二級(jí)結(jié)構(gòu)基本無(wú)變化，Linker部位具有柔性高、中性、抗原性低、不產(chǎn)生新的表位等特點(diǎn)，理論上不改變兩側(cè)蛋白分子的空間結(jié)構(gòu)和生物活性，符合重組體設(shè)計(jì)初衷，重組體設(shè)計(jì)合理，表達(dá)的蛋白生物活性在融合過(guò)程中未受影響。當(dāng)然，目前的結(jié)論只是理論上的推測(cè)，需在以后的實(shí)驗(yàn)中進(jìn)一步得到證實(shí)。

參考文獻(xiàn)

[1] van der Molen RG， Sprengers D， Binda RS， et al.FunctionalImpairment of Myeloid and Plasmacytoid Dendritic Cellsof Patients With Chronic Hepatitis B[J]. Hepatology，2004，40(3):738-746.

[2] Van Kooten C， Banchereau J.CD40瑿D40 ligand[J].J LeukocBiol，2000，67(1):2-17.

[3] Zhang LX，Tang YC，Akbulut H， et al.An adenoviral vectorcancer vaccine that delivers a tumor-associated antigen-CD40-ligand fusion protein to dendritic cells[J].PNAS，2003，100(25):15101-15106.

生活感悟短語(yǔ)范文第2篇

一、小化角度，限定范圍

在話(huà)題或命題作文前后添加詞語(yǔ)是限定范圍，小化角度的最好方法。一旦增添了詞語(yǔ)，話(huà)題或命題就立即變成主謂短語(yǔ)、偏正短語(yǔ)或動(dòng)賓短語(yǔ)，受到一定的限定，寫(xiě)作范圍就縮小了。如，話(huà)題是“微笑”，就擬定“微笑與陽(yáng)光”；話(huà)題是“感恩”，就擬定“要有一顆感恩的心”、“感恩微笑”；話(huà)題是“幸福”，就擬定“唱響幸福”、“幸福不是毛毛雨”。

需要說(shuō)明的是，限定命題作文的構(gòu)思范圍，一定要在草稿完成，或成竹在胸，而不能隨意改變命題，不然就會(huì)弄巧成拙。有一些半命題作文，選擇詞語(yǔ)既可決定內(nèi)容題材，也可以決定寫(xiě)作范圍，選擇另一半時(shí)，既要體現(xiàn)出事物的個(gè)性，使題材內(nèi)容更新更亮，出人意外，還要使詞語(yǔ)范圍盡量小一些。如，以“那一次，我嘗到的滋味”，一般考生大多填的是“勝利”“成功”“失敗”、“挫折”等，也有人填“閱讀”、“人生”等，這些詞語(yǔ)的意思寬泛且又常見(jiàn)，很難寫(xiě)出新意。也有考生結(jié)合自己的人生體驗(yàn)和情感精力，選擇“挨打”“碰壁”，選材新穎，角度小巧。

二、舍面取點(diǎn)，寫(xiě)細(xì)寫(xiě)活

“化大為小”，有時(shí)也體現(xiàn)在構(gòu)思時(shí)舍面取點(diǎn)，以點(diǎn)代面。這就是我們平常說(shuō)的，“滴水見(jiàn)太陽(yáng)”，“一粒沙里看世界，半瓣花上說(shuō)人情。因?yàn)槭挛锒际窍嗷リP(guān)聯(lián)的，點(diǎn)和面是局部與整體、個(gè)別與一般的辯證關(guān)系。巧妙地從生活中擷取能反映生活本質(zhì)的“點(diǎn)”，能起到以少勝多的功用。不妨欣賞精彩的片斷：

其實(shí)，像陶潛、劉禹錫一樣，生活簡(jiǎn)單而有所作為的人很多，如“茍全性命于亂世，不求聞達(dá)于諸侯”的孔明，“嘗趨百里外，從鄉(xiāng)之先達(dá)執(zhí)經(jīng)叩問(wèn)”的宋濂……采擷歷史長(zhǎng)河中的幾朵浪花，我們就很容易明白：簡(jiǎn)單也是一種美。

歷史的車(chē)輪轆轆遠(yuǎn)去，時(shí)代的汽笛聲聲高鳴……“簡(jiǎn)單還適用嗎？”趕潮流的年輕人發(fā)出這質(zhì)疑……

其實(shí)，生活真的很簡(jiǎn)單。面對(duì)生活中的不幸，多想想“月有陰晴圓缺，此事古難全”，不就少了一份痛苦與憂(yōu)愁了嗎？被物欲所擾，想想“盡管我有很多，但我需要的僅僅是一顆心”，心里就會(huì)多一份坦然與豁達(dá)。

“采擷歷史長(zhǎng)河中的幾朵浪花，我們明白簡(jiǎn)單也是一種美”，這正是舍面取點(diǎn)，寫(xiě)細(xì)寫(xiě)活的做法。將筆墨聚集到“浪花”上，可以少勝多，事半功倍。陶淵明“悠然見(jiàn)南山”、劉禹錫“何陋之有”都是足以代表簡(jiǎn)單生活的典范，“不求聞達(dá)于諸侯”的孔明、“嘗趨百里外”拜師求學(xué)的宋濂，追求的都是雖簡(jiǎn)單卻有價(jià)值的生活。如此材料，既突出文章的中心，又體現(xiàn)出文章的厚實(shí)，主題得到深化，提升了文章的品位。

三、彰顯長(zhǎng)處，展示亮點(diǎn)

“化大為小”還可以彰顯長(zhǎng)處，展示亮點(diǎn)。每個(gè)人對(duì)周?chē)氖挛锟倳?huì)有所偏愛(ài)，有些學(xué)生對(duì)音樂(lè)有著特殊的愛(ài)好且頗有研究，不少同學(xué)愛(ài)京劇，愛(ài)越劇，愛(ài)湖北大鼓……不僅自己能說(shuō)會(huì)唱，并且能說(shuō)出對(duì)這些藝術(shù)的感悟或見(jiàn)解。作文時(shí)，如果能根據(jù)文章內(nèi)容或主旨的需要，恰如其分融入你對(duì)這些藝術(shù)的鑒賞，展示你獨(dú)特的人生感悟，以這個(gè)點(diǎn)為題材，必定會(huì)有非同一般的表現(xiàn)。

看過(guò)中考滿(mǎn)分作文《聆聽(tīng)音樂(lè)》精彩片斷，相信你一定會(huì)有更多的感悟和啟迪。

聆聽(tīng)音樂(lè)――

阿炳的一生因有了《二泉映月》不再落寞，《二泉映月》的底蘊(yùn)，也因有了阿炳的執(zhí)著追求不再平凡。蒼穹之下，太湖邊上，一位盲人正撫琴獨(dú)憂(yōu)，用悲戚的琴聲控訴社會(huì)的黑暗，怒斥人心的冷漠。《二泉映月》讓阿炳沒(méi)有光彩的眼睛迸發(fā)出堅(jiān)毅與力量。

聆聽(tīng)音樂(lè)――

梁山伯與祝英臺(tái)的動(dòng)人一生，也為這精彩音樂(lè)增添光彩。聆聽(tīng)著，叫人不禁神往那段凄美的愛(ài)情，流連那傾注了太多思念的樓臺(tái)，迷戀那段幽婉的蝴蝶之舞……回環(huán)之余，《梁祝》成了不屈于封建禮教的最強(qiáng)音。

你看，那些耳熟能詳?shù)娜宋镆约澳切┯眯难V就的音樂(lè)，在考生嫻熟的筆端下緩緩流淌，展示了豐厚的音樂(lè)素養(yǎng)，通過(guò)音樂(lè)的風(fēng)格、意境，表達(dá)獨(dú)特的人生感受，讓人贊嘆。不少同學(xué)愛(ài)京劇，愛(ài)越劇，愛(ài)湖北大鼓……不僅自己能說(shuō)會(huì)唱，并且能說(shuō)出對(duì)這些藝術(shù)的感悟或見(jiàn)解。作文時(shí)，如果能根據(jù)文章內(nèi)容或主旨的需要，恰如其分融入你對(duì)藝術(shù)的鑒賞，展示你獨(dú)特的人生感悟，那你的作文該會(huì)具有怎樣的魅力啊！

更為可喜的是，隨著素質(zhì)教育深入開(kāi)展，《新課程標(biāo)準(zhǔn)》在教學(xué)中的滲透，學(xué)校對(duì)音樂(lè)、美術(shù)的重視，更有京劇走進(jìn)學(xué)校，相信，會(huì)有越來(lái)越多的學(xué)生能廣泛接觸自己所喜愛(ài)的藝術(shù)，并且在這個(gè)天地里展示自己的才情。

四、具體而微，精描細(xì)寫(xiě)

“化大為小”還體現(xiàn)選取某個(gè)獨(dú)特人物、某個(gè)特殊事件來(lái)寫(xiě)。如是歷史人物與事件，或還原再現(xiàn)其歷史情境，或挖掘附于其中的意蘊(yùn)，甚至還可進(jìn)行文學(xué)性再創(chuàng)造。由于寫(xiě)作角度小，因此便于“深耕細(xì)作”、精描細(xì)寫(xiě)，往往能充分展示自己的才情識(shí)見(jiàn)。

以“交流”為話(huà)題。當(dāng)許多考生還在“學(xué)習(xí)交流”、“師生交流”、“朋友交流”、“國(guó)際文化交流”等大眾化角度打轉(zhuǎn)的時(shí)候，一考生慧眼獨(dú)具，選中了“文成和蕃”這段民族交流的佳話(huà)，構(gòu)思精巧，高人一籌。

雄雞啼破了黑暗，迎來(lái)了拂曉，驚醒了夢(mèng)中佳人。你揉揉惺松睡眼，再次掀起窗簾，你吃驚了：遼闊的草原，一望無(wú)垠，小草綠得逼你的眼。你從未看見(jiàn)過(guò)這樣的世界，于是你知道：從此你將棄轎從騎，你將成為吐蕃一員。一只雄鷹滑過(guò)天空，一聲呼嘯劃破寧?kù)o，你欣慰地笑了。也許，你并沒(méi)有想到，你，一個(gè)民族的代表，一次義無(wú)反顧的交流，將兩個(gè)民族的血液融為了一體。

生活感悟短語(yǔ)范文第3篇

情侶之間一起去健身要說(shuō)點(diǎn)什么勵(lì)志的語(yǔ)錄鼓勵(lì)對(duì)方呢？下面是小編給大家整理的情侶健身勵(lì)志短語(yǔ)，供大家參閱!

情侶健身勵(lì)志短語(yǔ)精選1.運(yùn)動(dòng)是一切生命的源泉。

2.誰(shuí)也不可能輕易成功，它來(lái)自徹底的自我管理和毅力。

3.健康不是一切，但沒(méi)有健康就沒(méi)有一切。

4.身體健康者常年輕。

5.健康是智慧的條件，是愉快的秘訣。

6.靜止便是死亡，只有運(yùn)動(dòng)才能敲開(kāi)永生的大門(mén)。

7.健身能長(zhǎng)壽，不容再等候。

8.現(xiàn)在流的口水，將成為明天的眼淚。

9.運(yùn)動(dòng)是生命的滋潤(rùn)劑，健身是青春的美容師。

10.養(yǎng)生之道，常欲小勞，但莫大疲，及強(qiáng)所不能耳。

11.磨練肌胳，防病御癥。

12.活水貴在流動(dòng)，生命貴在運(yùn)動(dòng)。

13.走路對(duì)腦力勞動(dòng)者，特別是對(duì)創(chuàng)造性的人來(lái)說(shuō)，是一種生理活動(dòng)的最好方式。

14.體育之效，在于強(qiáng)筋骨，增知識(shí)，調(diào)感情，強(qiáng)意志。

15.開(kāi)始了，你來(lái)嗎?還是回去繼續(xù)做死胖子，這是男人的游戲!

情侶健身勵(lì)志短語(yǔ)經(jīng)典1.凡事有其自然，遇事處之泰然，得意之時(shí)淡然，失意之時(shí)坦然。

越忙越要抽空練，練好身體常保健;決心信心加恒心，修煉身心意志堅(jiān)。

2.最好的跑步，就是你在一個(gè)陌生的地方，發(fā)現(xiàn)一種久違的感動(dòng)。

獨(dú)自跑步，不受羈絆，沒(méi)有約束。有一天，穿上跑鞋，帶上自己，有多遠(yuǎn)，跑多遠(yuǎn)。

3.器官得不到鍛煉，同器官過(guò)度緊張一樣都是極其有害的。

4.凡事有其自然，遇事處之泰然，得意之時(shí)淡然，失意之時(shí)坦然。

越忙越要抽空練，練好身體常保健;決心信心加恒心，修煉身心意志堅(jiān)。

5.體育工作很重要問(wèn)題就是要增強(qiáng)人民體質(zhì)，這是一個(gè)國(guó)家富強(qiáng)、文明的標(biāo)志。

6.思想大門(mén)洞開(kāi)，情緒輕松愉快，鍛煉、營(yíng)養(yǎng)、藥物，健康恢復(fù)快哉!

7.全民健身，利國(guó)利民，功在當(dāng)代，利在千秋。

8.不會(huì)管理自己身體的人，就無(wú)資格管理他人;

經(jīng)營(yíng)不好自己健康的人，又如何經(jīng)營(yíng)好他的事業(yè)。

9.多一分運(yùn)動(dòng)，少一分病痛。

10.一個(gè)埋頭腦力勞動(dòng)的人，如果不經(jīng)常活動(dòng)四肢，那是一件極其痛苦的事情。

11.運(yùn)動(dòng)是健康的源泉，也是長(zhǎng)壽的秘訣。

12.做一個(gè)幸福的人，讀書(shū)、跑步、努力工作，關(guān)心身體和保持好心情，成為最好的自己。

13.如果你中途退出，那就不要再回來(lái)，因?yàn)橥ㄍ晒Φ缆飞衔覀兞粝碌哪_印早已被汗水浸沒(méi)。

14.今天不走，明天要跑。

15.生命就是運(yùn)動(dòng)，人的生命就是運(yùn)動(dòng)。

情侶健身勵(lì)志短語(yǔ)推薦1.只有汗水和鮮血澆鑄出來(lái)的才是真漢子!

2.出生的時(shí)候我就知道，我是來(lái)做強(qiáng)者的，健身只是一部分。

3.活動(dòng)有方，五臟自和。

4.理想的人是品德、健康、才能三位一體的人。

5.只有運(yùn)動(dòng)才可以除去各種各樣的疑慮。

6.我努力過(guò)了，不管成功與否我不后悔。

7.我生平喜歡步行，運(yùn)動(dòng)給我?guī)?lái)了無(wú)窮的樂(lè)趣。

8.人生要走萬(wàn)里路，邁好強(qiáng)身第一步。

9.日復(fù)一日地堅(jiān)持練下去吧，只有活動(dòng)適量才能保持訓(xùn)練的熱情和提高運(yùn)動(dòng)的技能。

10.即使此刻，對(duì)手也在不停地鍛煉。

11.凡事有其自然，遇事處之泰然，自得之時(shí)淡然，失意之時(shí)坦然。

越忙越要抽空練，練好身體常保健;決心信心加恒心，修煉身心意志堅(jiān)。

12.讀書(shū)，去別人的靈魂里偷窺。

旅行，去陌生的環(huán)境里去感悟。電影，去熒屏里感受別人的生活歷程。冥想，去自己內(nèi)心的秘境里探尋。跑步，去享受別人到不了的世界。

13.生命像河流，運(yùn)動(dòng)防腐臭。

14.我荒廢的今日，正是昨天殞身之人祈求的明天。

15.從鍛煉角度看，躺著不如坐著，坐著不如站著，站著不如走著。

16.世界上沒(méi)有比堅(jiān)固的肌肉和新鮮的皮膚更漂亮的衣服。

17.運(yùn)動(dòng)太多和太少，同樣的損傷體力;

飲食過(guò)多與過(guò)少，同樣的損傷健康;唯有適度可以產(chǎn)生、增進(jìn)、保持體力和健康。

18.思想大門(mén)洞開(kāi)，情緒輕松愉快，鍛煉、營(yíng)養(yǎng)、藥物，健康恢復(fù)快哉

19.跑步的真諦是越跑越痛快，跑下去，讓軟弱離開(kāi)身體。

生活感悟短語(yǔ)范文第4篇

近四年，江蘇的高考作文題都是“提示語(yǔ)+題目”。雖然“提示語(yǔ)”也得認(rèn)真分析，但最終還得圍繞“題目”去寫(xiě)，從這個(gè)意義上說(shuō)，“提示語(yǔ)+題目”仍然算命題作文。作為“命題作文”的題目有以下情況：

(一)一個(gè)詞做題目

1、用這個(gè)詞的本義。如上海題《忙》、北京題《寬容》。

2、用這個(gè)詞的比喻義。如遼寧題《肩膀》、福建題《季節(jié)》。

題目的字越少，可供自由發(fā)揮的空間就越大。正因?yàn)榭臻g大，也很容易空。可以化大為小，變虛為實(shí)，這既便于落筆，也容易寫(xiě)得實(shí)在、集中。有個(gè)方法，不妨試一試：在這個(gè)詞的前面或后面加一些字詞。這樣一來(lái)，也許就好些了。比如：

醒：在“醒”前加：夢(mèng)醒、覺(jué)醒、警醒、猛醒……在“醒”后加：醒悟、醒世、醒后是黎明……

生活：在“生活”前加：學(xué)習(xí)生活、文化生活、多彩的生活、苦難的生活、我的精神生活……在“生活”后加：生活的瞬間、生活的磨練、生活的甜蜜、生活的感悟……

(二)一個(gè)短語(yǔ)做題目

1、聯(lián)合短語(yǔ)。如江蘇題《人與路》，雖然可以有所側(cè)重，但“人”與“路”二者都必須寫(xiě)到。

2、偏正短語(yǔ)。如全國(guó)題《心靈的選擇》，要注意修飾語(yǔ)“心靈”，說(shuō)明所作的選擇不是隨便、輕率的，而是嚴(yán)肅、慎重的。

3、動(dòng)賓短語(yǔ)。如湖南題《談“意氣”》，它規(guī)定了論述對(duì)象是“意氣”，而論點(diǎn)可由自己確定。

(三)一個(gè)句子做題目

審題重點(diǎn)一般落在謂語(yǔ)上，如上海題《我想握住你的手》，圍繞“握住”做文章：誰(shuí)想“握住”，想“握住”什么，為什么想“握住”，“握住”以后怎么樣。

審清題意后，怎樣才能始終扣題而不至于偏題、跑題呢？第一，不要貪多求全：不能把想到的都寫(xiě)進(jìn)作文中去，這很容易造成內(nèi)容分散而使主旨不突出。第二，不要節(jié)外生枝：寫(xiě)了一件事后，忽然寫(xiě)了一個(gè)跟題目關(guān)系不大的甚至毫無(wú)關(guān)系的事，那就偏題了。第三，不要轉(zhuǎn)換話(huà)題：開(kāi)頭能扣住題目去寫(xiě)，但中途改變了原先扣題的那個(gè)話(huà)題，兩個(gè)話(huà)題不是同一概念。第四，不要無(wú)限聯(lián)想：恰當(dāng)?shù)穆?lián)想是思考深入的一種表現(xiàn)，但聯(lián)想太多，難免會(huì)出現(xiàn)一些聯(lián)想偏離題意的情況。

二、高考作文的取材

許多同學(xué)都說(shuō)沒(méi)什么東西可寫(xiě)，其實(shí)可寫(xiě)的內(nèi)容是很多的。

(一)材料來(lái)源

1、心靈世界：①自己成長(zhǎng)的經(jīng)歷②自己寫(xiě)過(guò)的文章(主要是隨筆)

2、現(xiàn)實(shí)世界：①家庭情趣②學(xué)校生活③社會(huì)實(shí)踐④城市建設(shè)⑤環(huán)境保護(hù)⑥文體活動(dòng)⑦流行歌曲⑧網(wǎng)絡(luò)信息

3、閱讀世界：①語(yǔ)文課本(詩(shī)文名句)②政治教材(哲學(xué)原理)③中外歷史(名人故事)④課外讀物(人文科技)⑤報(bào)紙刊物(最新材料)

(二)取材原則

多選親身經(jīng)歷的，少選道聽(tīng)途說(shuō)的；多選貼近現(xiàn)實(shí)的，少選古代歷史的；多選正面積極的，少選反面消極的；多選獨(dú)特個(gè)性的，少選大家熟悉的；多選含有細(xì)節(jié)的小故事，少選過(guò)于浮泛的大事件。

嚴(yán)格審題，緊扣題目，取材鮮活，抒寫(xiě)真情，條理清楚，語(yǔ)句通暢，定能取得高考作文的好成績(jī)。

三、高考作文如何求新

(一)取材求新

1、記敘文

從現(xiàn)實(shí)生活中取材，通過(guò)一個(gè)普通人的變化反映時(shí)代的新風(fēng)貌。從語(yǔ)文課本中取材，為一個(gè)文學(xué)形象編個(gè)新故事。從中外歷史中取材，為一位歷史人物編個(gè)新故事。要重視細(xì)節(jié)，傾注真情，力求生動(dòng)。

2、議論文

用一兩個(gè)事例作論據(jù)；用一組數(shù)據(jù)作論據(jù)。論據(jù)要新鮮、恰當(dāng)，還得緊扣題目對(duì)論據(jù)作理性的分析。

(二)形式求新

這里的“形式”專(zhuān)指文章的外部表現(xiàn)形態(tài)。

1、記敘文專(zhuān)用：①用好“三”：三個(gè)鏡頭、三處地點(diǎn)、三張照片、三次對(duì)話(huà)、三段時(shí)間……總之，不要平鋪直敘。②用倒敘：先寫(xiě)故事結(jié)局，再寫(xiě)故事的經(jīng)過(guò)，最好有點(diǎn)波瀾。

2、記敘文、議論文都可用：小標(biāo)題、日記體、書(shū)信體和訪談式。

(三)語(yǔ)言求新

這里所說(shuō)的“新”是指語(yǔ)言包含的內(nèi)容很豐富，或蘊(yùn)含的意思很深刻，或形式很鮮活。要做到全文語(yǔ)言都新，很難；局部有新意，努力一下，還是能做到的。以下方法供選用：

1、引用詩(shī)文名句；

2、適量運(yùn)用修辭；

3、局部變換句式；

4、穿插流行歌詞；

5、轉(zhuǎn)引大眾民謠。

四、臨考做些什么準(zhǔn)備

1、繼續(xù)背誦古詩(shī)文名句，不僅要背得熟，更要寫(xiě)得對(duì)。這不光是為了應(yīng)付默寫(xiě)，更是為了能在作文中引用。

2、找十篇近三年的高考佳作認(rèn)真看一看，不要背，主要是學(xué)學(xué)人家的構(gòu)思立意和某些寫(xiě)法。

3、搜索一點(diǎn)近一個(gè)月來(lái)報(bào)刊和網(wǎng)絡(luò)上的信息，以便作為高考作文的鮮活素材。

生活感悟短語(yǔ)范文第5篇

根據(jù)英語(yǔ)新課程標(biāo)準(zhǔn)，突出學(xué)生自主學(xué)習(xí)的主體地位，培養(yǎng)學(xué)生積極主動(dòng)探究知識(shí)的欲望和運(yùn)用語(yǔ)言的能力。倡導(dǎo)體驗(yàn)，實(shí)踐，參與、合作與交流的方式和任務(wù)型的教學(xué)途徑，培養(yǎng)學(xué)生綜合運(yùn)用語(yǔ)言的能力。

二、教材分析

本課時(shí)是《牛津初中英語(yǔ)》8B Unit5 Good manners中Reading部分的第一課時(shí)。本單元主要了解及學(xué)習(xí)各種好的禮儀相關(guān)的詞匯，學(xué)生能夠談?wù)摴矆?chǎng)所應(yīng)該掌握的禮儀及規(guī)則，我們應(yīng)該和不應(yīng)該做的事情。本課時(shí)閱讀教學(xué)的第一課時(shí)，主要學(xué)習(xí)并了解英國(guó)的有關(guān)禮儀，學(xué)會(huì)入鄉(xiāng)隨俗，了解異國(guó)文化，尊重他國(guó)的風(fēng)俗及禮儀。提高自身禮儀素養(yǎng)。從而讓學(xué)生用學(xué)到的知識(shí)談?wù)撟约旱母形颍嬲延⒄Z(yǔ)學(xué)習(xí)投入到實(shí)踐生活中，達(dá)到學(xué)以致用的目的。

三、教學(xué)目標(biāo)

1.知識(shí)目標(biāo)：能聽(tīng)懂并正確朗讀本課時(shí)涉及的四會(huì)單詞，掌握重要短語(yǔ)，理解重要句型。

2.技能目標(biāo)：①能\用默讀、快讀、細(xì)讀和研讀等閱讀方式閱讀課文，了解英國(guó)的有關(guān)禮儀，學(xué)會(huì)入鄉(xiāng)隨俗，了解異國(guó)文化。②尊重他國(guó)的風(fēng)俗及禮儀。提高自身禮儀素養(yǎng)。③培養(yǎng)學(xué)生自主學(xué)習(xí)的學(xué)習(xí)習(xí)慣，能積極參與小組合作交流，進(jìn)一步鞏固對(duì)文章的理解。

3.情感與態(tài)度目標(biāo)：①進(jìn)一步激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)英語(yǔ)的熱情，培養(yǎng)學(xué)生思維的發(fā)展。②培養(yǎng)自主學(xué)習(xí)、分組討論、大膽開(kāi)口、善于模仿的能力。③通過(guò)本課時(shí)的學(xué)習(xí)，激發(fā)學(xué)生熱愛(ài)自然的情感‘感悟一個(gè)人要想在某方面取得成功與自身的興趣、天賦、勤奮、努力是分不開(kāi)的。

四、教學(xué)重點(diǎn)和難點(diǎn)

1.教學(xué)重點(diǎn)：通過(guò)多種形式的閱讀活動(dòng)與任務(wù)培養(yǎng)閱讀策略，掌握一些閱讀技能，提高閱讀理解能力。

2.教學(xué)難點(diǎn)：幫助學(xué)生增長(zhǎng)知識(shí)，拓寬視野，培養(yǎng)學(xué)生樹(shù)立正確的人生觀。

五、教學(xué)方法

1.直觀法：運(yùn)用一小段專(zhuān)家解讀英國(guó)禮儀的小視頻導(dǎo)入新課，課堂中運(yùn)用多媒體課件展示英國(guó)禮儀的圖片呈現(xiàn)詞匯，調(diào)動(dòng)學(xué)習(xí)積極性，提高教學(xué)效果。

2.任務(wù)型教學(xué)：教會(huì)學(xué)生運(yùn)用不同的閱讀技巧，獲取有用的信息，達(dá)到理解文章的目的。

3.分層段教學(xué)：依據(jù)學(xué)生的認(rèn)知規(guī)律，由淺入深。

4.小組合作探究：培養(yǎng)學(xué)生合作交流學(xué)習(xí)的能力和綜合運(yùn)用知識(shí)的能力及團(tuán)結(jié)協(xié)作的精神。

六、教學(xué)過(guò)程

【目標(biāo)定向】

〔A〕1.能聽(tīng)懂并正確朗讀本課時(shí)涉及的四會(huì)單詞，掌握重要短語(yǔ)，理解重要句型。（self-assessment：Good Not bad Bad ）

〔B〕2.通過(guò)多種閱讀技巧，了解英國(guó)的有關(guān)禮儀。

（self-assessment：Good Not bad Bad ）

〔A〕3.學(xué)會(huì)入鄉(xiāng)隨俗，了解異國(guó)文化，尊重他國(guó)的風(fēng)俗及禮儀。提高自身禮儀素養(yǎng)。

（self-assessment：Good Not bad Bad ）

【個(gè)體自學(xué)】

讀前（Pre-reading）

〔A〕1.Warm up： Enjoy a video and know something about manners in the UK.

〔A〕2.呈現(xiàn)有關(guān)英國(guó)禮儀的圖片，同時(shí)呈現(xiàn)本課新單詞和詞組。

〔A〕3. Do Part B1 on page 68.

讀中（While-reading）

（A）1. First reading .Read the interview quickly and answer the questions.

（1） What is the interview about ？

（2） Who is Daniel interviewing ？ ？

〔B〕2.Second reading 將對(duì)話(huà)分為四部分。

3.Third reading .Read the conversation carefully

（A）4.Fourth reading .Read the interview carefully and then complete B2 on page 68.

5.Fifth reading. Enjoy the reading. Read after the tape.

Good manners in the UK

How to greet people

How to start a conversation

How to behave in public

How to behave at home

【同伴互導(dǎo)】

讀后（Post-reading） If you want to go to the UK ，you need to know good manners in the UK Please make a dialogue with your partner.

A：What do people do when they meet for the first time/ How do people start a conversation/How do people behave at home？

B：They say ‘Hello” or …

A：Do they usually greet with a kiss/Do people behave politely in public？

B：Yes/No，…

【教師解難】

Enjoy some pictures find the differences in manners between the UK and China.

（1）Do we always queue？

（2）Do all Chinese people behave politely in public？

（3）Should we be kind to the elderly？

（4）Do we need to improve our manners？

【練習(xí)檢測(cè)】Finish B3 on page 69.

【補(bǔ)充學(xué)習(xí)】