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楊萬(wàn)里的詩(shī)范文第1篇

原詩(shī)：坐看深來尺許強(qiáng)，偏於薄暮發(fā)寒光。半空舞倦居然嬾，一點(diǎn)風(fēng)來特地忙。

落盡瓊花天不惜，封它梅蕊玉無香。倩誰(shuí)細(xì)橪成湯餅，換卻人間煙火腸。

譯文：坐看落雪，其深已一尺有余，更在這黃昏時(shí)分發(fā)散著縷縷寒光。雪花在半空中舞到疲倦，顯得輕柔無力，然而些許微風(fēng)吹過，又翩然起舞。上天渾然不憐惜，讓瓊花似的雪落盡，將梅蕊、海棠的封存在冰雪之下，花香杳無。有誰(shuí)能將這高潔的雪做成湯和餅，來滌蕩人們滿是人間煙火的腸胃。

（來源：文章屋網(wǎng) ）

楊萬(wàn)里的詩(shī)范文第2篇

在此對(duì)其賠償金額之三次變數(shù)暫且不提，單說說這5萬(wàn)元的獎(jiǎng)勵(lì)吧。

既是獎(jiǎng)勵(lì)，自然有獎(jiǎng)勵(lì)的理由。在管理心理學(xué)中，獎(jiǎng)勵(lì)是對(duì)人的某種行為給予肯定與表?yè)P(yáng)，使人保持這種行為。那么，參照鐵路系統(tǒng)對(duì)于罹難者的獎(jiǎng)勵(lì)，大抵可以歸納為對(duì)罹難者家屬的某種行為給予肯定與表?yè)P(yáng)了。然而，這似乎并不符合邏輯。罹難者家屬的什么行為引發(fā)了鐵路系統(tǒng)的肯定繼而表?yè)P(yáng)呢？且肯定與表?yè)P(yáng)之下，讓惜金如命的鐵路系統(tǒng)不惜以5萬(wàn)元的“重金”進(jìn)行獎(jiǎng)勵(lì)呢？

罹難家屬幫忙救人了？并不是。罹難者幫鐵路系統(tǒng)發(fā)現(xiàn)了安全隱患，繼而獎(jiǎng)勵(lì)其家屬？說不通。那么，可能存在的原因便是：家屬提前簽訂賠償協(xié)議，使得鐵路系統(tǒng)在此次事故中應(yīng)該承擔(dān)的責(zé)任變小了，其在事故中的錯(cuò)誤造成的整個(gè)系統(tǒng)的壓力變小了，總而言之，鐵路系統(tǒng)在事故中最重要的麻煩變少了，這就需要獎(jiǎng)勵(lì)。

當(dāng)然“獎(jiǎng)”遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠，尚需要“勵(lì)”！不僅此次不要惹太多麻煩，下次、下下次，以后更多次，（我當(dāng)然希望這是最后一次，但是，您信嗎？）不要再發(fā)生此類事故之后給當(dāng)事單位惹麻煩，這就是獎(jiǎng)勵(lì)機(jī)制，通過這種獎(jiǎng)勵(lì)來減少壓力、解脫自己。這不能不說是利用人最寶貴的生命來?yè)Q取“平安符”的丑惡做法，表面是增加了賠償，實(shí)則是輕視生命、不尊重生命的表現(xiàn)。其用心之險(xiǎn)惡，“獎(jiǎng)勵(lì)”二字可見一斑！

獎(jiǎng)勵(lì)這個(gè)詞，自然不是鐵路系統(tǒng)隨口說出來的，既然已經(jīng)知道其獎(jiǎng)勵(lì)背后的卑劣目的，自然就知道了其選用這個(gè)詞的時(shí)候是怎樣的心領(lǐng)神會(huì)：“這是怎樣的一個(gè)詞啊。感謝倉(cāng)頡先生，造出了這樣兩個(gè)字，太貼切了！”這個(gè)目的的存在，實(shí)在讓他們想不到還有哪個(gè)詞比“獎(jiǎng)勵(lì)”更能真切地體現(xiàn)他們的處境，以及急于擺脫這種不利處境的迫切心情。

楊萬(wàn)里的詩(shī)范文第3篇

關(guān)鍵詞：工商管理專業(yè)；人才培養(yǎng)模式；監(jiān)控體系；實(shí)踐基地

中圖分類號(hào)：G642 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1002-2589（2016）03-0192-02

隨著我國(guó)高等教育規(guī)模不斷擴(kuò)大，高校學(xué)生毛入學(xué)率的不斷提高，生源質(zhì)量也不同于精英教育階段，高等教育已經(jīng)進(jìn)入了大眾化教育階段，給高校發(fā)展帶來機(jī)遇的同時(shí)，提出了更嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。《國(guó)家中長(zhǎng)期教育改革和發(fā)展規(guī)劃綱要（2010-2020年）》（以下簡(jiǎn)稱《綱要》）[1]中明確指出：“提高質(zhì)量是教育改革發(fā)展的核心任務(wù)，樹立以提高質(zhì)量為核心的教育發(fā)展觀，注重教育內(nèi)涵發(fā)展，鼓勵(lì)學(xué)校辦出特色、辦出水平，出名師，育英才。”因此，在實(shí)際教學(xué)過程中，如何實(shí)現(xiàn)分類分層教學(xué)，如何提高人才培養(yǎng)質(zhì)量，形成具有本校特色的人才培養(yǎng)模式，是擺在工商管理專業(yè)教師面前的一項(xiàng)艱巨任務(wù)。

一、工商管理專業(yè)人才培養(yǎng)模式的現(xiàn)狀

（一）實(shí)行彈性學(xué)分制

這種人才培養(yǎng)模式主要是針對(duì)課程設(shè)置而進(jìn)行的改革，學(xué)生可以在八年時(shí)間里修完專業(yè)要求的所有課程而畢業(yè)[2]。這種模式在一定程度上緩解了過去課程設(shè)置的弊端，增強(qiáng)了學(xué)生選課的自主性，學(xué)生可以根據(jù)自己的實(shí)際情況和興趣愛好自主選擇課程。但是，有很多學(xué)生為了盡量早畢業(yè)，用大學(xué)三年的時(shí)間把大學(xué)四年要修的課程都修完，這就造成了學(xué)生一周之內(nèi)需要上大量的課程，影響了學(xué)生對(duì)于知識(shí)的消化和吸收，同時(shí)也影響了學(xué)生的全面發(fā)展。

（二）分類分層人才培養(yǎng)模式

這種人才培養(yǎng)模式主要針對(duì)學(xué)生對(duì)專業(yè)知識(shí)的學(xué)習(xí)而言[3]。學(xué)生進(jìn)入專業(yè)課學(xué)習(xí)階段后，學(xué)校可以根據(jù)學(xué)生的自身特點(diǎn)和興趣，實(shí)行分類、分層教學(xué)，設(shè)置不同的專業(yè)課程模塊供學(xué)生來選修，也可以把專業(yè)方向細(xì)化為不同的模塊，比如人力資源管理、物流管理、生產(chǎn)與運(yùn)作管理、創(chuàng)業(yè)管理等，學(xué)生可以根據(jù)自己的喜好、優(yōu)勢(shì)等情況選擇相關(guān)模塊的課程，通過學(xué)習(xí)，使學(xué)生在某一方面具有較深厚的造詣。

（三）“3+1”人才培養(yǎng)模式

這種人才培養(yǎng)模式是近年來比較盛行的模式[4]，即要求學(xué)生在大學(xué)前三年主要從事專業(yè)學(xué)習(xí)，在大學(xué)的最后一年從事社會(huì)實(shí)踐。這種模式的優(yōu)點(diǎn)就是能夠使學(xué)生有足夠的時(shí)間從事社會(huì)實(shí)踐，但是學(xué)生要用三年時(shí)間將四年的課程學(xué)完，一定程度上增加了學(xué)生的學(xué)習(xí)壓力，而且如果學(xué)校沒有校外實(shí)踐基地，讓學(xué)生自己從事社會(huì)實(shí)踐，就必然會(huì)導(dǎo)致學(xué)生盲目地到企業(yè)打工掙錢，從而與專業(yè)培養(yǎng)目標(biāo)相悖。

（四）“3.5+0.5”人才培養(yǎng)模式

這種人才培養(yǎng)模式也受很多高校所推崇，即要求學(xué)生用三年半的時(shí)間學(xué)完大學(xué)所有課程，最后半年通過社會(huì)實(shí)踐來撰寫畢業(yè)論文。這種人才培養(yǎng)模式既能夠讓學(xué)生有足夠的時(shí)間從事專業(yè)知識(shí)的學(xué)習(xí)，又能夠抽出一定的時(shí)間讓學(xué)生從事社會(huì)實(shí)踐。但是如果專業(yè)課程設(shè)置不合理也必然無法實(shí)現(xiàn)專業(yè)人才培養(yǎng)目標(biāo)。

（五）“1+2.5+0.5”人才培養(yǎng)模式

這種人才培養(yǎng)模式是在高校專業(yè)大類招生情況下實(shí)施的，即按照大類專業(yè)來招收學(xué)生，在大學(xué)一年級(jí)不分具體專業(yè)，到大學(xué)二年級(jí)學(xué)生根據(jù)自己的興趣可以任意選擇大類專業(yè)下的具體專業(yè)進(jìn)行學(xué)習(xí)。這種培養(yǎng)模式的優(yōu)勢(shì)就是能夠讓學(xué)生通過一年的學(xué)習(xí)，再根據(jù)對(duì)自身、專業(yè)、社會(huì)人才需求的認(rèn)識(shí)，重新進(jìn)行專業(yè)的選擇和定位。

二、工商管理專業(yè)人才培養(yǎng)模式存在的問題

北方工業(yè)大學(xué)是一所北京市教委主管的地方院校，目前工商管理專業(yè)本科有3個(gè)班，專升本有2個(gè)班，每一屆學(xué)生有170人左右。目前，工商管理專業(yè)的人才培養(yǎng)模式已逐步從“3.5+0.5”模式向“1+2.5+0.5”模式轉(zhuǎn)化，但從人才培養(yǎng)的過程和培養(yǎng)目標(biāo)來看，仍然存在一些問題。

（一）培養(yǎng)目標(biāo)與人才培養(yǎng)過程脫節(jié)

學(xué)校工商管理專業(yè)培養(yǎng)學(xué)生的目標(biāo)是把學(xué)生培養(yǎng)成既懂技術(shù)又懂管理的復(fù)合應(yīng)用型人才。但是，在人才培養(yǎng)過程中，不僅學(xué)生的管理理論素養(yǎng)沒能得到提高，學(xué)生的實(shí)踐能力也沒有得到鍛煉。學(xué)生在選擇就業(yè)單位時(shí)，往往感到無所適從，達(dá)不到用人單位的高標(biāo)準(zhǔn)、嚴(yán)要求，培養(yǎng)過程質(zhì)量與培養(yǎng)目標(biāo)嚴(yán)重脫節(jié)。

（二）個(gè)別專業(yè)課程設(shè)置不合理

一般情況下，在大學(xué)學(xué)習(xí)階段，通識(shí)課、專業(yè)基礎(chǔ)課應(yīng)當(dāng)盡量安排大學(xué)一、二年級(jí)，專業(yè)必修課安排在大學(xué)三、四年級(jí)。學(xué)校工商管理專業(yè)的課程設(shè)置中，部分課程設(shè)置不合理，有個(gè)別專業(yè)課程安排在了大學(xué)一、二年級(jí)，而且還呈現(xiàn)過度娛樂化，這勢(shì)必會(huì)讓學(xué)生與其他課程進(jìn)行對(duì)比，從降低了對(duì)其他課程學(xué)習(xí)的積極性。

（三）校外實(shí)踐基地不健全

學(xué)校校內(nèi)的實(shí)踐教學(xué)內(nèi)容已經(jīng)非常豐富，但對(duì)于校外實(shí)踐基地的建設(shè)一直落后于同類院校，無法達(dá)到教學(xué)大綱規(guī)定的實(shí)踐教學(xué)目標(biāo)。因此建立校外實(shí)踐基地對(duì)于工商管理專業(yè)學(xué)生的培養(yǎng)來講顯得非常重要，也是提高學(xué)生實(shí)踐能力的有力保障。

三、工商管理專業(yè)人才培養(yǎng)模式的完善

（一）完善人才培養(yǎng)監(jiān)控體系

通過對(duì)人才培養(yǎng)方案的完善修訂，建立健全各類人才培養(yǎng)監(jiān)測(cè)點(diǎn)的考核標(biāo)準(zhǔn)，明確培養(yǎng)計(jì)劃中專業(yè)評(píng)價(jià)各監(jiān)測(cè)點(diǎn)的內(nèi)容、目標(biāo)以及人才培養(yǎng)質(zhì)量考核的標(biāo)準(zhǔn)和方法，具體體現(xiàn)學(xué)校的專業(yè)建設(shè)特色和專業(yè)評(píng)價(jià)體系的有效實(shí)施[5]。在人才培養(yǎng)過程中，應(yīng)當(dāng)建立配套的監(jiān)測(cè)點(diǎn)和監(jiān)控體系，完善工商管理專業(yè)的人才培養(yǎng)監(jiān)控體系，如圖1所示。

學(xué)校和學(xué)院可以通過制訂人才培養(yǎng)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、實(shí)施方案和相關(guān)規(guī)章制度，建立起高效優(yōu)質(zhì)的人才培養(yǎng)保障、服務(wù)和支撐體系，確保人才培養(yǎng)質(zhì)量監(jiān)控有效實(shí)施，保障人才培養(yǎng)方案的順利實(shí)施。

（二）突出特色，注重質(zhì)量，提高人才培養(yǎng)質(zhì)量

工商管理專業(yè)是學(xué)校的老牌專業(yè)，從學(xué)校到學(xué)院都非常重視學(xué)科建設(shè)和人才培養(yǎng)模式的改革。為了提高學(xué)生的實(shí)踐能力，實(shí)踐教學(xué)的比重在逐步增大，但是校外實(shí)習(xí)基地的建設(shè)還一直不夠健全。因此，加強(qiáng)校外實(shí)習(xí)基地建設(shè)對(duì)于突出人才培養(yǎng)特色，提高人才培養(yǎng)質(zhì)量有著重要的意義。在現(xiàn)有教學(xué)實(shí)習(xí)的模式下，可以逐步與一些大型國(guó)有企業(yè)建立長(zhǎng)期合作關(guān)系，定期派學(xué)生到企業(yè)去實(shí)習(xí)、鍛煉，使學(xué)生真正把所學(xué)理論知識(shí)與企業(yè)實(shí)踐結(jié)合起來，從實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)問題，再結(jié)合所學(xué)知識(shí)解決問題，實(shí)現(xiàn)理論與實(shí)踐的有機(jī)結(jié)合，從而更加突出北方工業(yè)大學(xué)工商管理專業(yè)的人才培養(yǎng)特色。

（三）構(gòu)建人才培養(yǎng)模塊，優(yōu)化人才培養(yǎng)方案

結(jié)合學(xué)校工商管理專業(yè)特色和社會(huì)需求，構(gòu)建人才培養(yǎng)特色模塊。在加強(qiáng)理論教學(xué)（通識(shí)課+基礎(chǔ)課+專業(yè)課）的同時(shí)，注重實(shí)踐教學(xué)的質(zhì)量和效果，聯(lián)系幾家大型企業(yè)作為學(xué)生校外實(shí)踐基地，在實(shí)踐中構(gòu)建“1+2+1”人才培養(yǎng)模塊或“1+2+0.5+0.5”人才培養(yǎng)模塊，加強(qiáng)課堂教學(xué)、實(shí)踐教學(xué)、企業(yè)實(shí)踐的密切聯(lián)系。

1.“1+2+1”人才培養(yǎng)模塊

在學(xué)校工商管理專業(yè)大類招生背景下，構(gòu)建“1+2+1”人才培養(yǎng)模塊勢(shì)在必行。在這種人才培養(yǎng)模塊中，校外實(shí)踐基地的建設(shè)顯得尤為重要。學(xué)生在大學(xué)期間除了學(xué)習(xí)專業(yè)知識(shí)，要用最后一年的時(shí)間去企業(yè)實(shí)習(xí)和鍛煉，在實(shí)踐中檢驗(yàn)所學(xué)專業(yè)知識(shí)的掌握程度，發(fā)現(xiàn)問題，及時(shí)補(bǔ)救。

2.“1+2+0.5+0.5”人才培養(yǎng)模塊

這種人才培養(yǎng)模塊也是符合學(xué)校工商管理專業(yè)發(fā)展和社會(huì)需求的。學(xué)生在大學(xué)期間除了學(xué)歷理論知識(shí)外，在最后一年中用半年時(shí)間在企業(yè)實(shí)習(xí)，再用半年的時(shí)間結(jié)合企業(yè)實(shí)踐撰寫畢業(yè)論文，從實(shí)現(xiàn)理論與實(shí)踐的有機(jī)結(jié)合。

3.優(yōu)化人才培養(yǎng)方案

結(jié)合人才培養(yǎng)模塊，優(yōu)化人才培養(yǎng)方案，是實(shí)現(xiàn)工商管理專業(yè)人才培養(yǎng)目標(biāo)的重要途徑。制訂新的人才培養(yǎng)方案應(yīng)著重從課程設(shè)置、專業(yè)實(shí)習(xí)、課程設(shè)計(jì)、校外實(shí)踐等幾個(gè)方面來進(jìn)行改進(jìn)。首先課程設(shè)置應(yīng)從學(xué)生實(shí)際和學(xué)校的人才培養(yǎng)目標(biāo)出發(fā)，科學(xué)、合理地制訂學(xué)生在三個(gè)階段的課程，在第一階段（一年級(jí)）應(yīng)著重通識(shí)課程的學(xué)習(xí)，把數(shù)學(xué)、外語(yǔ)、專業(yè)基礎(chǔ)課的學(xué)習(xí)作為重中之重；在第二階段（二、三年級(jí)）著重專業(yè)基礎(chǔ)課和專業(yè)必修課程的學(xué)習(xí)，在第三階段（四年級(jí)）重點(diǎn)放在學(xué)生的實(shí)踐方面，努力提高學(xué)生的實(shí)踐能力。其次，專業(yè)實(shí)習(xí)可放在每年的寒假和暑假，學(xué)校和與企業(yè)達(dá)成合作意向，組織學(xué)生進(jìn)入企業(yè)調(diào)研和實(shí)踐。課程設(shè)計(jì)課程的設(shè)置根據(jù)課程特點(diǎn)和專業(yè)培養(yǎng)目標(biāo)而制訂。校外實(shí)踐基地是專業(yè)實(shí)習(xí)和畢業(yè)實(shí)踐的重要保障，學(xué)校應(yīng)當(dāng)把建設(shè)校外實(shí)踐基地作為人才培養(yǎng)的重中之重。

四、結(jié)語(yǔ)

工商管理是一門實(shí)踐性非常強(qiáng)的學(xué)科，該專業(yè)的人才培養(yǎng)目標(biāo)應(yīng)該定位于著重培養(yǎng)學(xué)生的實(shí)踐能力、協(xié)調(diào)溝通能力和創(chuàng)新能力。當(dāng)前，學(xué)校工商管理專業(yè)正面臨著前所未有的挑戰(zhàn)和發(fā)展機(jī)遇，為實(shí)現(xiàn)人才培養(yǎng)目標(biāo)，應(yīng)堅(jiān)持以市場(chǎng)需求為導(dǎo)向，以學(xué)生為中心，抓住重點(diǎn)，突出特色，重點(diǎn)培養(yǎng)學(xué)生的學(xué)習(xí)能力、應(yīng)變能力、適應(yīng)能力、人際溝通、協(xié)調(diào)和創(chuàng)新能力，提高學(xué)生發(fā)現(xiàn)、分析和解決實(shí)際問題的能力。

參考文獻(xiàn)：

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楊萬(wàn)里的詩(shī)范文第4篇

團(tuán)聚前夕慈父走失，央視主持人心碎了

2012年8月12日，唐山一家酒樓，一場(chǎng)熱鬧非凡的婚禮正在舉行。賓朋們都對(duì)新郎孫昊霖的勵(lì)志故事贊嘆不已。曾經(jīng)，他只是唐山歌舞團(tuán)一名普通員工。2006年，他進(jìn)京發(fā)展，數(shù)年積累后一鳴驚人：2012年勇奪央視《星光大道》月冠軍，隨后進(jìn)入央視軍事?農(nóng)業(yè)頻道，擔(dān)任《美麗中國(guó)鄉(xiāng)村行》欄目主持人。女友于樂游是一家家具公司職員，兩人相戀4年，感情甚篤。這一天也是父親孫國(guó)軒最激動(dòng)的一天。一對(duì)新人在臺(tái)上笑靨如花，孫國(guó)軒在臺(tái)下也合不攏嘴。婚后第三天，孫吳霖和于樂游要返回北京。他想讓父親和自己一起去北京生活，父親卻搖了搖頭：“現(xiàn)在還不是時(shí)候。等你在北京買了房，有了孩子，爸就過去幫你們帶孩子。”

2012年11月9日，孫昊霖剛走出央視演播大廳就接到大姐的電話：‘快，爸突發(fā)腦溢血，在醫(yī)院搶救！’孫昊霖連夜趕回唐山，了解到父親發(fā)病的經(jīng)過：天氣轉(zhuǎn)冷，父親準(zhǔn)備買煤在家燒暖氣過冬。本來―個(gè)電話煤廠就能將蜂窩煤送到家，但父親為了省120塊錢運(yùn)費(fèi)，硬是自己踩著三輪車往返5趟往家運(yùn)煤。父親運(yùn)最后一趟時(shí)，突發(fā)腦梗塞。唐山人民醫(yī)院里，父親躺在病床上，陷入昏迷……孫昊霖握著父親干枯而又冰冷的手，淚流滿面。

父親一生坎坷，因家里窮38歲才結(jié)婚，妻子曾有過一段婚姻，帶著兩個(gè)兒子兩個(gè)女兒嫁過來。父母婚后第一年生下了孫昊霖。在他童年的記憶里，雖然家境貧困，但一家人過得平靜和睦。孫昊霖10歲那年，母親因心肌梗塞去世。其后，父親欲再婚，但少不更事的孫吳霖堅(jiān)決阻止，直到他20歲考入唐山歌舞團(tuán)，父親才重組家庭，臉上也多了笑容。不料2009年繼母意外溺水身亡，父親十分悲傷，每天早晨7點(diǎn)就去公園拉二胡，一邊拉一邊落淚。

第二天，父親終于蘇醒。老人睜開眼，第一句話竟是：“你和樂游工作那么忙，我給你們添麻煩了。”孫昊霖失聲痛哭：“爸，等你病好了跟我們?nèi)ケ本┌桑∥以僖膊话涯阋粋€(gè)人扔下了！”

接下來短暫的幾天，在孫昊霖的記憶中盈滿為數(shù)不多的溫馨。他教父親唱歌，給他講述這些年的“北漂”經(jīng)歷。

幾天后的一個(gè)早晨，孫吳霖從醫(yī)院食堂買回早餐，孫國(guó)軒突然愣愣地望著他，帶著幾分怯意問：“你是？”孫吳霖傻了：“爸，你怎么了？”然而父親忽然掙扎著起身，要往外走：“這是什么地方？我怎么在這里？”孫昊霖趕緊按床頭呼叫鈴。主治大夫趕來一問，孫國(guó)軒又叫出了孫昊霖的名字，昨晚聊天內(nèi)容也記得一清二楚。孫昊霖一頭霧水。大夫解釋：“這種情況屬典型的小腦萎縮，是腦梗塞后遺癥造成的。”孫昊霖心如刀絞，他決定盡快將父親帶到北京醫(yī)治。11月20日，孫國(guó)軒病情得到控制，孫昊霖為父親辦理出院手續(xù)，將他托付給大姐照顧后，火速返回北京，著手將租住的單間換成一套兩居室。11月28日下午，孫昊霖打掃好新房間，正準(zhǔn)備動(dòng)身回唐山，大姐忽然打來電話：“爸上午去超市買東西，到現(xiàn)在還沒回來！”

孫昊霖瘋狂地打電話給唐山所有的親戚……

從央視辭職尋父，有一種孝心叫義無反顧

當(dāng)晚，孫吳霖的二姐和兩個(gè)哥哥也相繼趕到。他們召集30多位親友，明確分工：兄妹5人分別帶領(lǐng)一個(gè)小組，以家為中心在周邊20公里范圍內(nèi)搜尋。孫昊霖連夜印了500份尋人啟事，在社區(qū)、公園、街道、火車站、汽車站張貼。不知不覺天就亮了，孫昊霖?zé)o力地靠在路邊的欄桿上，他第一次感到人生像幻覺―樣。他不停地鼓勵(lì)自己，也許下一刻，父親就會(huì)在晨曦中出現(xiàn)，笑吟吟地看著他……來不及合眼，孫昊霖又逐一找到父親的老同事詢問，向在公園經(jīng)常聽父親拉二胡的老人打聽。一位掃馬路的大姐告訴他，11月28日上午，她看見孫國(guó)軒騎車往519國(guó)道方向去。孫昊霖一個(gè)激靈，立即帶領(lǐng)幾位親友沿國(guó)道兩側(cè)的餐廳、旅店、超市尋找。每一份希望都激動(dòng)人心，又都在極度盼望中逐一被現(xiàn)實(shí)磨滅。3天后，哥哥姐姐帶領(lǐng)的搜索小組也失望返回唐山。幾天幾夜沒吃飯的孫吳霖有氣無力地回到家中。

報(bào)警后，孫昊霖又在唐山電視臺(tái)尋人啟事。等待數(shù)日，絕望將他緊緊包裹，無法喘息。在眾人的勸說下，12月4日，他黯然返回北京。白天，孫昊霖要打起精神主持節(jié)目；晚上，他靠在床上暗自落淚。父親的走失幾乎摧毀了孫昊霖的生活。

2013年2月9日黎明，孫昊霖又一次被噩夢(mèng)驚醒。世界安靜得像夢(mèng)一樣，窗外正飄著雪花。孫昊霖慢慢從床上坐起來，孫昊霖披衣而起，和著淚水寫了一首歌《爸爸你去哪兒了》：“老爸你去哪啦/你可知道兒子在牽掛/老爸你去哪啦/兒永遠(yuǎn)等你回家/十歲那年媽媽走了/留下我和我的老爸老爸雖沒啥文化腳含辛茹苦將我養(yǎng)大……”歌詞飽蘸淚水，一個(gè)念頭也油然而生：放下一切，去尋找父親1

2013年春節(jié)后，孫昊霖向大姐宣布：“我準(zhǔn)備辭職找咱爸。”哥哥姐姐堅(jiān)決反對(duì)：“你從北漂歌手到今天容易嗎？爸不見了，我們也還得讓生活越來越好啊！”然而無論他們?cè)趺磩瘢矡o法動(dòng)搖孫昊霖的決心。正當(dāng)孫吳霖猶豫著以何種方式將計(jì)劃告訴妻子時(shí)，于樂游已從大姐那里得知消息。2013年3月6日，孫昊霖下班回到家，于樂游問：“大姐說的都是真的嗎？”孫昊霖不吱聲，于樂游一下子火了：“你還想要寶寶，到時(shí)拿什么養(yǎng)孩子？你不僅要對(duì)你爸負(fù)責(zé)，也得對(duì)我負(fù)責(zé)啊！”孫昊霖輕輕抱住妻子：“我們來日方長(zhǎng)……”掙扎了兩日，孫昊霖還是瞞著妻子向領(lǐng)導(dǎo)遞交了辭呈。半個(gè)月后，孫昊霖的辭職報(bào)告批下來了。他不敢止訴于樂游，回家后輕輕地壓在床頭柜上。于樂游發(fā)現(xiàn)后徹底憤怒了，當(dāng)即提出離婚，并搬進(jìn)了單身宿舍。看著衣柜空了一邊，孫吳霖才從恍惚中回過神來。

第二天一早，孫昊霖煲了一罐烏雞湯送到妻子公司。此時(shí)，于樂游的怨氣已消弭許多。孫吳霖難過地拉住她的手：“我媽走后，很多人給爸介紹對(duì)象，家里只要一來陌生女人，我就用彈弓夾石子彈人家……上高中時(shí)，我愛好音樂，做夢(mèng)都渴望擁有一把吉他。爸爸撫養(yǎng)5個(gè)孩子，經(jīng)濟(jì)非常拮據(jù)。整整一個(gè)冬天，他下班后靠在雪地里拉磚頭，掙了100元錢給我買了吉他，但他手上被凍裂的血口子又深又長(zhǎng)，夾得住硬幣……”孫昊霖?cái)?shù)度哽咽落淚。于樂游的眼睛也紅了，沒有再掙脫他的手。

2013年5月，孫昊霖花3萬(wàn)元去二手車市場(chǎng)淘回一輛二手金杯車。他將后排座椅拆掉，加裝一個(gè)折疊沙發(fā)，打開就是一張小雙人床；一個(gè)塑料箱用來放衣服、被褥及生活用品。他還在車身兩側(cè)，用藍(lán)色不干膠張貼“尋父大篷車”5個(gè)搶眼大字。5月16日，夫婦倆駕駛“導(dǎo)父大篷車”從北京出發(fā)，踏上悲壯的尋父征程。

“尋父大篷車”走天涯，20萬(wàn)里孝心找回父親

夫妻倆設(shè)計(jì)的路線為：河北、山東、河南、山西。他們尋找的第一站，是與唐山交界的廊坊。到達(dá)廊坊，孫昊霖與于樂游分頭行動(dòng)：他向公安機(jī)關(guān)和社會(huì)救助站備案、求助，調(diào)取走失流浪人員的視頻資料；于樂游去車站、市場(chǎng)、公園張貼尋人啟事……夜里，兩人相擁擠在車?yán)锏男∩嘲l(fā)床上。

但讓孫昊霖怎么也沒有想到的是，幾天后，于樂游突然感覺身體不適，到附近的社區(qū)診所檢查，竟然發(fā)現(xiàn)懷孕了！近1個(gè)月來，小兩口餓了啃冷面包，渴了喝礦泉水，孫昊霖想到就羞愧難當(dāng)。他攬住妻子單薄的雙肩，眼里一下子蒙了一層淚。于樂游反而勸他：“繼續(xù)找吧，你一個(gè)人在外面，我也不放心。”

尋父繼續(xù)。廊坊沒有發(fā)現(xiàn)父親的蹤跡，孫昊霖夫婦轉(zhuǎn)而趕往與唐山毗鄰的滄州。7月4日，孫昊霖夫婦在滄州泊頭鎮(zhèn)派出所調(diào)閱2012年12月26日的監(jiān)控錄像。當(dāng)一個(gè)模糊的影像出現(xiàn)時(shí)，孫昊霖失聲叫了出來。那不是父親嗎！上午9點(diǎn)至11點(diǎn)的視頻中，孫昊霖隱約看到父親沿著泊頭中學(xué)往東走。夫妻倆跑出派出所，又開始瘋狂尋找。遺憾的是，整整半個(gè)月，兩人尋遍了滄州的每個(gè)角落，也沒發(fā)現(xiàn)父親的蹤影。

滄州與山東交界，也許父親已經(jīng)離開河北達(dá)到山東？孫昊霖決定臨時(shí)改變路線，放棄河北境內(nèi)的秦皇島、衡水等地，直奔山東。

兩天后，“尋父大篷車”行駛至山東德州。一位賣西瓜的大爺告訴孫昊霖，濱德高速公路立交橋下有個(gè)拾荒老人，已在那里住兩個(gè)月了。孫吳霖以最快的速度找到拾荒老人，可根本不是父親。孫昊霖默默將200元錢放在老人身邊，悵然離去……

顛沛流離中，4個(gè)月過去了。夫妻倆出門時(shí)帶的3萬(wàn)元花得精光。未來的路，要尋父、要養(yǎng)子，孫昊霖不得不沿途在酒吧和夜總會(huì)唱歌。

11月上旬，夫婦倆來到山東泰安。傍晚在翻越蓮花山時(shí)，車子爆胎環(huán)在了半山腰。孫昊霖?fù)艽蚓仍娫挘蛘f不出準(zhǔn)確位置，夫婦倆在車?yán)锢Я舜蟀胨蕖＾D(zhuǎn)眼大半年，尋父之旅每天都在進(jìn)行卻又毫無進(jìn)展，經(jīng)濟(jì)更加窘迫。于樂游和孫昊霖商量：“昊霖，過幾個(gè)月孩子就出生了，你不能完全將事業(yè)丟在―邊。”孫昊霖十分慚愧。2013年12月，孫昊霖聽說北京有個(gè)演出能掙5000多元錢，他就去參加。演出完畢，又第一時(shí)間趕來與妻子會(huì)合……就在如此艱難的環(huán)境中，2014年1月，孫昊霖參加央視大型娛樂節(jié)目《黃金100秒》比賽，竟一舉奪得冠軍。

2014年2月28日，夫婦倆到達(dá)河南新鄉(xiāng)。孫昊霖下車去集貿(mào)市場(chǎng)張貼尋父啟事，于樂游在駕駛室里等丈夫。中午時(shí)分，于樂游腹部忽然襲來一陣劇痛，寶寶要降生了！她掙扎著給孫昊霖打了個(gè)電話。孫昊霖趕緊駕車趕往縣醫(yī)院。顛簸中，于樂游感到撕心裂肺的劇痛，接著身子一空。孫吳霖回頭一看，不禁兩腿發(fā)軟，兒子在車上出生了！1個(gè)星期后，孫昊霖將妻兒送回北京，請(qǐng)?jiān)滥笌兔φ疹櫋?月，他依依不舍地告別妻兒，再次返回河南尋父。

2015年3月，孫昊霖開著他的“大篷車”，趕赴山西長(zhǎng)治武鄉(xiāng)縣。他接到當(dāng)?shù)匾粋€(gè)養(yǎng)蜂人的電話，稱這里有位老人很像他父親。3月17日，到達(dá)武鄉(xiāng)縣后，孫昊霖第―時(shí)間與養(yǎng)蜂人聯(lián)系。他被帶到一戶平常的農(nóng)舍前。像往常每一次心懷希望一樣，他緊張地看著門被敲開，希望那一瞬間洞開奇跡。

一位老人出現(xiàn)了。孫昊霖忽然身體發(fā)直，失聲痛哭：“爸――”終于見到了朝思暮想的父親！然而父親愣愣地看著孫昊霖，已經(jīng)不認(rèn)識(shí)他。一陣哭訴之后，孫昊霖被請(qǐng)進(jìn)家門。原來，收留孫國(guó)軒的是一位名叫王玉庭的孤寡老人，與孫國(guó)軒同齡。第二天，孫昊霖開著他的“大篷車”，將父親接回北京。孫昊霖的哥哥姐姐聞?dòng)嵹s來，一家人喜極而泣。

楊萬(wàn)里的詩(shī)范文第5篇

關(guān)鍵詞：甲烷古菌； Hungate除氧系統(tǒng)； 富集； 滾管分離； 純培養(yǎng)

中圖分類號(hào)：Q939文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1006-3315（2014）04-170-003

厭氧微生物的分離是黔南民族師范學(xué)院微生物課程開放性實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目之一。目前國(guó)內(nèi)高校多數(shù)實(shí)驗(yàn)室對(duì)嚴(yán)格厭氧菌分離純化主要采用焦性沒食子酸法、厭養(yǎng)罐法、厭養(yǎng)培養(yǎng)箱法等[1]。焦性沒食子酸法進(jìn)行厭養(yǎng)菌分離培養(yǎng),由于其方法簡(jiǎn)單，操作容易,在大專院校微生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)中仍廣泛使用,但操作過程厭氧條件不易控制，特別是對(duì)嚴(yán)格厭氧的甲烷古菌分離效果差。厭養(yǎng)罐法能夠?yàn)閰捬蹙L(zhǎng)提供嚴(yán)格厭氧的環(huán)境，但不能為整個(gè)分離純化操作過程提供厭氧環(huán)境，使用受到限制。厭養(yǎng)培養(yǎng)箱法雖然能為厭氧菌分離培養(yǎng)提供嚴(yán)格厭氧環(huán)境，需要特制設(shè)備,在厭氧箱中操作也不方便，由于價(jià)格昂貴，因而其應(yīng)用受到一定限制。為此，為了改進(jìn)厭氧細(xì)菌的分離純化方法，結(jié)合對(duì)厭氧消化器中甲烷古菌的分離與純化開放性實(shí)驗(yàn)，借助Hungate除氧系統(tǒng)進(jìn)行稀釋滾管分離，收到了很好的效果，現(xiàn)將有關(guān)技術(shù)介紹如下。

一、材料用具

1.接種物

取自黔南民族師范學(xué)院微生物實(shí)驗(yàn)室厭氧發(fā)酵缸（厭氧消化器）底部的沉積物。

2.儀器用具

2.1Hungate除氧系統(tǒng)。Hungate除氧系統(tǒng)由高純氫氣、高純氮?dú)猓~柱，加熱套，不銹鋼分支管，橡皮膠管，注射器及9號(hào)針頭等組成。銅柱結(jié)構(gòu)直徑30～50mm、長(zhǎng)300～500mm的石英玻璃管，兩端加工成漏斗狀，便于連接膠管，玻璃管中裝入碎銅絲（長(zhǎng)10～20mm，直徑0.5mm），壓緊，銅絲下面墊上玻璃纖維以防止碎銅絲散落，上端留出50mm左右的空間。銅柱外纏繞加熱帶，銅柱頂端用膠管與具有分支的不銹鋼通氣總管連接。不銹鋼總管下的各分支管用橡皮膠管連接，橡皮膠管的另一端連接1mL塑料質(zhì)注射器，注射器再與9號(hào)針頭連接（圖1）。

圖1Hungate厭氧操作系統(tǒng)示意圖

2.2其它器具。高壓滅菌鍋，恒溫水浴鍋，恒溫培養(yǎng)箱，熒光顯微鏡，厭氧管（16×160mm），厭氧瓶（100mL），光波爐，3000 mL三角瓶，各種規(guī)格的注射器（1mL、2mL、5mL）等。

二、方法

1.獲取無氧N2、H2、CO2氣體

甲烷菌是嚴(yán)格厭氧微生物，都能利用H2和CO2合成CH4，一般分離甲烷菌都用H2和CO2作為營(yíng)養(yǎng)。其分離過程需要人工保持一個(gè)無氧環(huán)境進(jìn)行操作和供其生長(zhǎng)繁殖。用于分離嚴(yán)格厭氧微生物使用的氣體雖然是高純氣體（99.999%），但仍然含有微量的O2，利用Hungate銅柱除氧系統(tǒng)可除掉這些微量的O2，提供和保持無氧環(huán)境。

2.銅柱除氧與還原

銅柱除氧原理：實(shí)驗(yàn)使用的高純氣體（N2、H2、CO2）中含有微量的O2，當(dāng)氣體經(jīng)過銅柱時(shí)，這些氣體中的微量O2與Cu反應(yīng)生成CuO（O2＋CuCuO），從而流出銅柱的氣體則為無O2氣體。

銅柱還原：銅柱使用后，里邊的Cu被氧化為CuO不能繼續(xù)與O2發(fā)生化合反應(yīng)，失去除氧能力。此時(shí)，關(guān)掉其它氣體，通入H2，同時(shí)使銅柱升溫（達(dá)350℃），當(dāng)H2通過高溫銅柱時(shí)，銅柱內(nèi)CuO與H2反應(yīng)（CuO＋H2Cu＋H2O）生成單質(zhì)Cu，CuO在加熱條件下（350℃）被H2還原為Cu，銅柱恢復(fù)除氧能力可反復(fù)使用。

操作步驟：打開Hungate銅柱除氧系統(tǒng)通氣橡皮管的通氣開關(guān)（止水夾），開啟H2鋼瓶，H2氣流通過銅柱，從銅柱里流出的H2用橡皮管引出室外。此時(shí)接通電熱套電源，銅柱升溫，溫度達(dá)到350℃左右，20～30min后，銅柱內(nèi)的碎銅絲被H2還原，由黃黑色變?yōu)榧冦~錚亮色，當(dāng)銅柱里面的水蒸氣被排出完全后，關(guān)閉H2鋼瓶，銅柱還原結(jié)束。

3.獲取無氧N2、H2和CO2氣體

無氧N2用于厭氧菌分離操作和培養(yǎng)過程中驅(qū)趕空氣，保證局部無氧環(huán)境。在銅柱還原結(jié)束后，立即打開N2鋼瓶，氣流大小控制以針頭對(duì)準(zhǔn)操作者手背5cm距離明顯感覺到氣流為宜，并隨時(shí)注意控制氣流的大小。此時(shí)銅柱內(nèi)的碎銅絲處于還原狀態(tài)的單質(zhì)銅，當(dāng)通入高純N2（99.999%）時(shí)，其中所含的極微量氧與單質(zhì)銅反應(yīng)，氧被固定下來（形成CuO），流出銅柱的則是無氧N2。利用無氧N2氣流驅(qū)趕厭氧管、血清瓶等培養(yǎng)容器和培養(yǎng)基中的空氣，以及挑菌時(shí)保證無氧環(huán)境。使用完畢后，先關(guān)緊N2鋼瓶，接著用止水夾封閉所有橡皮管。無氧H2、CO2的獲取方法操作步驟相同。

2.制備無氧培養(yǎng)基

2.1培養(yǎng)基配方（詳見表1）

表1培養(yǎng)基配方表[2]

注：微量元素溶液配制時(shí)先溶解氨三乙酸，NaOH調(diào)pH于6.5左右。依次溶解其它化合物，最后調(diào)pH于7.0。

3.制備方法

按照配方稱取藥品置于事先放有適量蒸餾水的三角瓶中溶解后，加入1mL的1‰刃天青液（W/V），0.4g的鹽酸半胱氨酸，用NaOH調(diào)節(jié)pH值，加足需要水量，用記號(hào)筆在三角瓶外壁標(biāo)上記號(hào)，加入一定量的蒸餾水作蒸發(fā)量后，置于光波爐加熱煮沸10min后，通入無氧N2（驅(qū)趕空氣，保持培養(yǎng)基為無氧狀態(tài)）煮沸至培養(yǎng)基顏色變白后再煮10min左右進(jìn)行分裝。用9號(hào)針頭連接的橡皮管，將無氧N2引入待裝培養(yǎng)基的厭氧管和厭氧瓶（16×160mm厭氧管、100mL厭氧瓶）洗管、瓶（用無氧N2換出瓶中空氣，使容器中無氧分子存在），用培養(yǎng)基分液器進(jìn)行分裝，厭氧管裝4.5mL，厭氧瓶裝45mL，待裝好培養(yǎng)基后取出N2管塞上橡膠塞，旋緊蓋子。轉(zhuǎn)好培養(yǎng)基的厭氧試管用專用布袋裝好與厭氧瓶一起置121℃，0.1MPa滅菌20min待用。（厭氧瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基使用前加入無菌無氧1%Na2S溶液0.1mL和10%NaHCO30.1mL，厭氧管內(nèi)培養(yǎng)基使用前加入1%Na2S溶液0.02mL和10%NaHCO30.02mL）。

4.甲烷菌富集

用水樣取樣器取沼氣底泥5克于上述裝有45mL培養(yǎng)基的厭氧瓶中，利用Hungate厭氧系統(tǒng)，按H2/CO2體積比為40/10的比例分別加入H280mL、CO220mL，置30℃恒溫培養(yǎng)30天，用化學(xué)吸收法[3]檢測(cè)厭氧瓶是否有甲烷氣體產(chǎn)生，在甲烷菌生長(zhǎng)對(duì)數(shù)增長(zhǎng)中期，從產(chǎn)甲烷氣體的富集瓶中取樣進(jìn)行滾管分離。

5.滾管分離和純化培養(yǎng)

5.1滾管分離培養(yǎng)。對(duì)檢測(cè)有甲烷菌存在的富集處理，進(jìn)行第1次滾管分離。在分離培養(yǎng)基中補(bǔ)加瓊脂粉（20g/L），分裝于厭氧試管（16 mm×160mm，4.5mL培養(yǎng)基/管），滅菌。滅菌后置55℃水浴中保持液態(tài)，每支厭氧管中分別加入1%Na2S溶液0.02mL和10%NaHCO30.02mL。用1mL無菌無氧注射器取富集的樣品液0.5mL，作10-1～10-9梯度稀釋，重復(fù)3次，每支試管上下倒2～3次（注意不要產(chǎn)生氣泡），使樣品與培養(yǎng)基充分混勻并立即將稀釋管置于裝有4℃以下冰水的磁盤中迅速滾管，使培養(yǎng)基與樣品均勻光滑無氣泡凝固于管壁上。

將滾管分離樣品的厭氧管置于試管架上，按H2/CO2體積比為40/10的比例分別加入H240mL、CO210mL，置30℃恒溫培養(yǎng)30天，在管壁的培養(yǎng)基上有明顯的菌落出現(xiàn)，用化學(xué)吸收法檢測(cè)是否有甲烷氣體產(chǎn)生。對(duì)有甲烷氣體產(chǎn)生的管子，置于熒光顯微鏡下觀察菌落，對(duì)有熒光反應(yīng)的菌落用記號(hào)筆畫圈作出記號(hào)，待進(jìn)一步分離培養(yǎng)。

5.2甲烷菌純化。純化過程是多次挑取單菌落、稀釋滾管培養(yǎng)的過程。截取細(xì)玻璃管（內(nèi)徑0.5cm、外徑0.8cm，長(zhǎng)15cm），兩端塞上脫脂棉，在酒精燈的火焰上加熱并拉成毛細(xì)管，高溫滅菌并烘干。在無氧條件下挑菌：將有熒光反應(yīng)菌落的管子置于鐵架臺(tái)上固定，打開管口，用無氧N2吹入管中，使管內(nèi)保持無氧狀態(tài)。取毛細(xì)管一端與橡膠管連接（橡膠管一端用夾子封住，含在口中），另一端（2mm左右處）在酒精燈火焰上加熱并使之彎成約90℃，用它的彎頭接觸到有熒光記號(hào)的菌落，輕吸一口氣，使菌落進(jìn)入毛細(xì)管，移出毛細(xì)管并快速放入有4.5mL培養(yǎng)基的無氧管子中，迅速塞上膠塞的同時(shí)折斷毛細(xì)管并旋上外蓋。按H2/CO2體積比為40/10的比例分別加入H240mL、CO210mL，置30℃恒溫培養(yǎng)30天，在管壁的培養(yǎng)基上有明顯的菌落出現(xiàn)，用化學(xué)吸收法檢測(cè)是否有甲烷氣體產(chǎn)生。

通過單菌落分離獲取的菌液經(jīng)培養(yǎng)后底部有沉淀出現(xiàn)，用吸收法檢測(cè)管中有無甲烷氣體產(chǎn)生。對(duì)有甲烷氣體的菌管，用上述方法再進(jìn)行2次滾管分離，則可獲得甲烷菌的純培養(yǎng)。挑取純培養(yǎng)菌落進(jìn)行液體培養(yǎng)30d后，置4℃條件下進(jìn)行保藏，同時(shí)進(jìn)行鑒定。

6.甲烷菌鑒定

6.1菌落熒光反應(yīng)檢測(cè)。利用產(chǎn)甲烷古菌在特定波長(zhǎng)（420nm）激發(fā)下能產(chǎn)生特有的藍(lán)綠熒光，對(duì)分離到的樣品管進(jìn)行菌落熒光反應(yīng)檢測(cè)，有熒光反應(yīng)的樣品管證明其有甲烷菌存在。

6.2產(chǎn)甲烷氣體檢測(cè)。利用甲烷菌能產(chǎn)生甲烷氣體的特性，將有熒光反應(yīng)的樣品管用氣相色譜儀或化學(xué)吸收法進(jìn)行產(chǎn)甲烷氣體檢測(cè)，有甲烷氣體產(chǎn)生的樣品管，再一次證明樣品中有甲烷菌存在。

6.3產(chǎn)甲烷菌純度檢測(cè)。用1mL注射器抽取有熒光反應(yīng)的樣品液置熒光顯微鏡下觀察，菌體有熒光產(chǎn)生，物氣體雜菌，則為甲烷菌純菌，并將置常溫冰箱4℃保藏，待進(jìn)一步研究或應(yīng)用。

三、結(jié)果與小結(jié)

1.結(jié)果

1.1利用稀釋滾管分離法從厭氧消化器中分離獲得99支甲烷古菌純培養(yǎng)，經(jīng)產(chǎn)甲烷氣體和熒光反應(yīng)鑒定證明是甲烷菌（圖2）。

甲烷桿菌屬甲烷短桿菌屬甲烷球菌屬甲烷微球菌屬

Methanobacterium Methanobrevibacter Methanococcus Methanobacterium

（1000×） （1000×）（1000×）（1000×）

圖2采用稀釋滾管分離純化法得到的甲烷菌圖片

1.2甲烷菌分離純化技術(shù)流程

經(jīng)上述試驗(yàn)，歸納建立甲烷菌分離純化技術(shù)，其流程如下：

第一次滾管分離

第二次滾管分離

第三次滾管分離

1.3小結(jié)

采用Hungate厭氧操作系統(tǒng)清除氧氣徹底，操作過程能及時(shí)發(fā)現(xiàn)和控制無氧環(huán)境。培養(yǎng)基中加入對(duì)氧氣敏感的刃天青指示劑，能及時(shí)觀察操作過程的無氧狀態(tài)，使整個(gè)操作過程和培養(yǎng)都在無氧狀態(tài)，滿足嚴(yán)格厭氧的要求。建立的稀釋滾管分離法操作簡(jiǎn)便、利用熒光顯微鏡觀察，菌落易于辨認(rèn)，易挑取，操作過程不易污染，分離效率高等優(yōu)點(diǎn)。只要滿足厭氧微生物的營(yíng)養(yǎng)需求，樣品中的厭氧微生物都能分離出來。

基金項(xiàng)目：黔教高發(fā)[2012]426號(hào)；黔南民族師范學(xué)院微生物學(xué)重點(diǎn)學(xué)科[2011.6]；黔南民族師范學(xué)院教學(xué)質(zhì)量工程項(xiàng)目院教發(fā)[2011]5號(hào)。

參考文獻(xiàn)：

[1]龐德公,楊紅建.產(chǎn)甲烷菌的分離純化培養(yǎng)及其培養(yǎng)基對(duì)于菌株的選擇作用[J]中國(guó)畜牧獸醫(yī),2010，37(6)：32―35