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血細胞分析儀具有快速、方便、重復性好、工作效率高等特點。目前各大、中醫院檢驗科已廣泛應用。但血細胞分析儀測定血小板計數,常會出現結果誤差,這是臨床經常遇到的問題。為此,本文主要對血細胞分析儀計數血小板的影響因素進行分析,旨在為臨床提供可靠的診斷依據。
1 材料與方法
1.1 儀器:采用的儀器是日本Sysmex公司生產的KX-21型全自動血細胞分析儀。
1.2 試劑 ① 儀器用的稀釋液、清洗液、溶血劑均由日本Sysmex公司提供。② 顯微鏡計數用的血小板稀釋液按《全國臨床檢驗操作規程》(第二版)配制,冰箱保存。 ③EDTA-K2抗凝劑
1.3 標本來源 選自2008年1月-2008年12月本院門診及住院的血小板結果異常的血標本共207例,另挑選血小板結果正常的血100作對照。
1.4 用EDTA-K2抗凝全血2ml,充分混勻后,2小時內KX-21型全自動血細胞分析儀檢測,取血小板檢測結果異常的血標本,同時用顯微鏡手工計數,另取血小板檢測結果正常的血標本100例同時用顯微鏡手工計數,比較兩法結果。
2 結果
血小板少于100×109/L的血標本121例,為A組;血小板大于300×109/L的血標本86例,為B組;lind板在100~300×109/L的血標本100例,為C組,其兩法測定結果如表1所示。
3 討論
3.1 在Sysmex X-21型全自動血細胞分析儀檢測中,由于紅細胞和血小板的計數是在同一通道中進行,且它們之間僅以體積大小來區別,因此,血小板的計數易受小紅細胞數量或紅細胞碎片的影響,由于血液中小紅細胞的數量遠大于血小板數量,即使有少量的小紅細胞混入血小板計數范圍內,也會對血小板計數造成很大的影響。在血小板直方圖右側下降后繼而抬高呈駝峰樣改變,血片油鏡檢查顯示紅細胞較小或紅細胞碎片較多,兩種方法血小板計數結果比較,差異有統計學意義(P<0.01).
3.2 由于血小板的特點易于粘附、聚集。李永紅等認為采血是否順利是造成血小板偏低的的一個重要原因。采血過程中因操作緩慢,穿刺不順且組織受損后,組織凝血因子易混入血標本,混勻不及時等均可促成血小板聚集,從而產生肉眼看不見的小凝塊,這是血細胞分析儀測定血小板結果偏低的常見原因之一。這時血片鏡檢可見血小板聚集成堆。遇到這種情況應重新采血測定。
3.3 某些血液病可造成血小板數真正減少,如骨髓巨核細胞生成不良(如障);血小板破壞增加(如DIC、IPT);血小板分布異常(如脾大)等。
3.4 標本放置時間過長、試劑質量、地線、電源和藥物等因素均能對血小板的計數造成一定程度的影響,因此檢測過程中應盡可能排除各種因素的干擾,以使血小板計數可靠,為臨床診斷治療提供有參考意義的數據。
參考文獻
[1] 趙紅燕.血液細胞儀測定血小板計數結果的分析.上海醫學檢驗雜志,1998.1.3(2):27
[2] 陳夢珍。血細胞分析儀測定血小板影響因素的探討。江西醫學學報,2005,23(3):243-244
[3] 詹靈凌,秦雪、林發全等。血細胞分析儀計數血小板的影響因素分析與糾正,廣西醫科大學學報,2004.21(5):763-764。
[4] 李永紅、鐘步云。血細胞分析儀測定血小板結果偏低的原因及糾正方法。臨床檢驗雜志,2001.192:112.
血小板計數是血液常規檢驗的重要項目之一,在臨床檢驗工作中,常發現少數病人經全自動血細胞分析儀進行血小板檢測時,血小板測定值常不準確,血小板數值與臨床癥狀不相符,為探討其發生原因,本文對120例健康人血標本進行重復監測,尋找血細胞分析儀計數血小板的準確性及重復測定的可比性及影響因素。
1.材料與方法
1.1儀器
深圳邁瑞公司生產的BC-5500血液分析儀。
1.2試劑
BC-5500專用配套試劑(溶血劑、稀釋液、清洗液)。
1.3其他
校準物與質控液,全血校準液(由深圳邁瑞公司提供),全血質控物(由青海省臨檢中心提供)。
1.4方法
1.4.1按儀器維護保養要求,對儀器進行全面的維護,經常保持微孔的清潔,以保證BC-500在正常條件下批內重復測定變異數(RCV)在規定范圍內,每次實驗前血液分析儀用全血校準物校準儀器后,嚴格按儀器操作步驟進行測試。
1.4.2用含EDTA-K抗凝管,采集120例健康人靜脈血2ml,輕輕混勻后,立即在血液分析儀BC-500上測定3次,然后分別于5、10、20、30、60min各測3次,并用全血質控物質同步監測儀器,分別計算其均值,按時間分組,分別利用多樣本均數間顯著性檢驗與配對t檢驗進行統計學分析。
2.結果
2.1標本自身因素的影響
由于采血過程不順利,過分擠壓或未充分與抗凝劑混勻等因素人為造成血小板的凝集,是造成血小板計數不準確的首要原因。
2.2標本放置時間的影響
WBC在采血后0―30min內隨時間延長其數量不規則遞減,組與組之間差異有顯著性(P
2.3血小板聚集分可逆聚集和不可逆聚集
當新鮮靜脈血加入EDTA―K2:抗凝瓶混勻后血小板即發生聚集反應,此時立即進行全血細胞測定,可逆聚集的血小板還沒有解聚,會造成全血細胞分析結果誤差。白細胞不同程度假性升高,直方圖的小細胞群會出現一個很高的截距,血小板不同程度的假性降低,直方圖就會出現鋸齒波或尾部抬高。但抗凝血靜置30min后,再進行測定,即可消除上述假性結果。100例靜脈血放置不同時間各參數的均值比較可看出60min與30min測定值差異無顯著性(P>0.05),30min與20min測定值差異有顯著性(P
3.討論
BC-5500型血細胞分析儀計數血小板的原理是直接計數2―20fl范圍內的血小板,根據正態分布理論,用電子擬合線擬合0―70fl范圍內的血小板數量作最終報告結果,具有雙曲線的血小板直方圖是它的標準結果,只具有單曲線的血小板直方圖,只要成正態對數分布,曲線在20fl范圍內有明顯的主峰,其儀器計數法與顯微鏡計數法較一致,與臨床基本吻合[1]。血小板膜分內膜和外膜,外膜圍繞胞質形成漿膜,并延伸到胞質內部并折疊形成開放微小管系統,它是血小板攝取和釋放的通道。質膜內側附著許多微絲,其主要成分為肌動蛋白的肌凝蛋白,與微管環周束共同支持偽足的形成。當新鮮靜脈血離體加入EDTA―K抗凝瓶內,管壁周圍的全血外環境及溫度發生改變,使血小板形態發生變化[2]。由于血小板發生聚集,在阻抗法做血小板計數時,聚集體所產生的脈沖大于儀器預設的單一血小板脈沖值,因而就不會計數血小板結果內,從而使血小板數量減少。
故血小板聚集的原因可能有:
(1)抗凝劑EDTA―K2:能使血小板形態發生改變。由盤狀變成球狀,從而使可逆聚集血小板的偽足回縮到血小板胞質內,血小板相互纏繞的偽足就可解除。
(2)可逆聚集的血小板由于形態有所改變及偽足的形成,增大了血小板表面積,其表面負電荷相應增大,同性電荷的排斥力也就相應增強。
(3)溫度升高,分子運動速度越快,溫度對可逆聚集血小板解聚的影響尤其在用預稀釋方法作全血細胞測定中更為明顯。
(4)溶血劑的加入量、溶血時間和儀器檢測的清潔度有關,因此必須保持微孔的清潔,才能保證儀器測定的可靠性。原因:經EDTA―K2抗凝的全血標本,在采血30min后進行全血細胞分析,可提高結果的準確性。但需排除化療、血小板減少性紫癜、白血病及造血系統異常等疾病。血小板形態不規則且細小,任何灰塵和斑點都會影響計數。反復使用的測定管極易引起雜質吸附,造成殘余溶血素污染,從而引起PLT計數偏高。血細胞分析儀檢測血小板的準確性取決于很多因素,環境、溫度、抗凝劑混合情況以及所有影響電脈沖大小及數目的因素都會影響正確計數。因此,只有正確操作,排除各種干擾,才能使血小板的計數結果準確靠。
參考文獻:
【關鍵詞】 SYSMEX XT-1800i血細胞分析儀; 紅細胞平均體積; 小紅細胞; 血小板計數
doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2012.28.043
隨著科學技術的高速發展,血細胞分析儀在臨床上得到了普遍應用。其速度快、易操作、功能強為臨床提供了不同層次有效的血細胞參數,為血細胞計數的篩查方法。但由于其檢測原理的局限性,使結果易受多種因素影響,血小板結果偏高是常見的問題。SYSMEX XT-1800i血細胞分析儀應用庫爾特原理,采用電阻抗法進行細胞計數。當體積大小不等的血細胞通過儀器計數小孔時,引起小孔內、外電流和電壓的變化,形成與血細胞數量相當,體積大小相應的脈沖變化,從而間接地區分出血細胞。血小板與紅細胞計數區域常有交叉,體積偏小的紅細胞其脈沖信號可能被視為血小板信號,造成血小板計數假性增高[1]。為了解電阻抗法小紅細胞對血小板計數的影響,筆者按紅細胞平均體積的大小分類,比較電阻抗法與顯微鏡法血小板計數的差異,現將結果報告如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料 選擇2011年5-11月本院門診及住院的180例患者。按MCV大小進行分組,第一組MCV 70~81.9 fl,第二組MCV 60~69.9 fl,第三組MCV
1.2 儀器與試劑 血細胞分析儀:采用日本SYSMEX XT1800i全自動分析儀及原裝配套試劑與質控物。手工法:雙目顯微鏡,改良牛鮑計數板,試劑為1%草酸銨稀釋液,按全國臨床檢驗技術操作規程第3版配置[2]。
1.3 檢測方法 在空腹狀態下,抽取患者靜脈血2 ml,加入含EDTA-K2抗凝劑的真空試管中,輕輕搖勻,在2 h內檢測完畢。檢測標本前,每日用儀器原裝質控物做質控,保證儀器在控的前提下檢測患者標本。儀器檢測標本的同時進行顯微鏡計數,用毛細吸管抽取20 μl靜脈血加入0.38 ml草酸銨稀釋液中,搖勻后滴入計數板,室溫靜置后,經有經驗的工作人員計數兩次取平均值。
1.4 統計學處理 采用SPSS 10.0軟件進行統計學處理,計量資料以(x±s)表示,采用t檢驗,以P
2 結果
MCV 70~81.9 fl時,儀器法與手工法比較差異無統計學意義(P>0.05)。MCV 60~69.9 fl時,儀器法與手工法比較差異有統計學意義(P
3 討論
血小板檢測是研究凝血與止血功能的重要指標之一,也是手術前必要檢查的項目。臨床上很多疾病都能引起血小板的增高,如慢性粒細胞性白血病、原發性血小板增多癥、真性紅細胞增多癥。一些疾病還可引起血小板反應性增高,如急性化膿性感染、大出血、急性溶血、腫瘤等。因此,血小板檢測結果的可靠性至關重要。
SYSMEX XT-1800i全自動血細胞分析儀采用電阻抗原理,根據顆粒的大小來區別細胞,與顆粒的性質無關。紅細胞和血小板同在一個檢測通道,儀器把2~30 fl范圍的細胞判定為血小板,而將25~250 fl范圍的細胞判定為紅細胞,因而紅細胞與血小板之間存在計數的交叉區域。當紅細胞體積正常時,與血小板體積懸殊很大,不會干擾血小板計數。紅細胞體積偏小時,儀器會將小紅細胞誤認為血小板,使血小板假性升高。而且MCV越小,對血小板計數影響越大,血小板計數假性增高就越多[3]。臨床上最常見的小細胞性貧血有缺鐵性貧血、地中海性貧血。紅細胞分布寬度(RDW)是紅細胞體積異質性參數,反應紅細胞體積大小不一致的程度。MCV 70~81.9 fl,RDW異常時,小紅細胞比例增加,血小板假性升高。當患者標本中的小紅細胞增多時,血小板相應參數PDW、P-LCR、PCT不出結果,儀器報警提示血小板分布異常,直方圖右側抬高,不與橫坐標重合甚至平行,呈拖尾狀,這是因為小紅細胞的脈沖被誤認為血小板,而體積又比血小板大的原因[4]。
綜上所述,電阻抗法檢測血小板時,容易受小紅細胞干擾。在實際操作過程中,檢驗人員應掌握儀器的原理,觀察圖形及報警,出現MCV小于70 fl或MCV在70~81.9 fl之間而RDW大于14.5%時,應及時顯微鏡復檢,減少血小板計數誤差,提高檢驗結果的準確性和可靠性。
參考文獻
[1] 胡前平.小紅細胞對血小板測定的影響[J].檢驗醫學與臨床,2006,3(9):480.
[2] 葉應嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規程[M].第3版.南京:東南大學出版社,2006:136-137.
[3] 王勛松,張宇晴.小紅細胞對BC-5500血細胞分析儀血小板計數的影響[J].檢驗醫學與臨床,2010,4(7):737-738.
各級醫院臨床檢驗應用中非常廣泛的儀器之一就是血細胞分析儀,隨著計算機技術的快速發展和數據處理技術的日新月異,血細胞分析儀的自動化水平和可檢測維度也越來越高,給臨床檢驗帶來了極大的方便性和準確性。筆者在基層醫院的臨床應用中,積累了許多檢測數據和病例,并進行了對比分析,結合實際進一步探究了影響血細胞分析儀測定結果的實踐因素。
1 環境溫度的干擾
實驗室環境溫度決定了儀器、試劑以及標本的溫度,計數時稀釋液的溫度應為( 22±4) ℃ 。當稀釋液的溫度低時,紅細胞溶解后的膜碎片聚集, 粒度分布曲線的平坦段變短,當試劑溫度低于18 ℃時需加熱使用。有些溶血劑在低溫時可出現結晶, 并不容易被察覺,很難引起操作者的注意,但在顯微鏡下, 可見到其中懸浮著許多細小的結晶,這樣的溶血劑滴入血液中,白細胞計數必然增高。我們基層醫院地處北方,這種情況在實際操作中時有發生,尤其是在冬季。血細胞分析儀分析不出稀釋液在低溫時產生的聚合結晶,常使分析結果出現異常。在臨床中可以將溶血劑或稀釋液進行加熱,以升高溫度, 消除結晶。還可加入適量的非離子表面活性劑,從而減輕溶血劑結晶的發生。低溫也易激活血小板,引起血小板凝集, 造成血小板計數假性降低。
2 抗凝劑的影響
ABX60血液細胞分析儀檢測EDTA-K2 含量不同的靜脈血,臨床結果表明EDTA-K2 有效抗凝劑量在1.5~ 6. 0mg/ mL時,不影響分析結果。自制抗凝瓶EDTA-K2 用量1.5~ 2.2mg/ mL為宜。低于1. 5mg/mL時抗凝效果欠佳, 出現肉眼不易發現的凝集,可表現為血小板降低。在采血時,一般2mL的采血量,其誤差在± 0. 5mL范圍內的話比較適宜。血量過多或過少都會對結果造成影響,血量過多抗凝不充分,會出現凝塊;血量過少, 會導致抗凝劑過濃。筆者分析認為,由于血細胞遇抗凝劑先有一個短暫的(1~ 2min) 收縮過程, 這是因為鉀離子進入血漿以后,改變了滲透壓,導致水從細胞內流出所致。隨后細胞將鉀離子泵進膜內,細胞又恢復原態。絕大部分患者的標本這一時間只需要幾分鐘, 但也有人需要20~ 30 min。抗凝劑過濃會延長這個平衡時間。
3 標本放置時間的影響
筆者通過觀察總結,發現標本存放3~ 6 h對多數血液分析參數均有不同程度的影響, 主要影響WBC和PLT 結果。但有部分標本在放置的8h內大部分參數沒有顯著改變, 而平均血小板體積、血小板分布寬度、大血小板比率和血小板壓積在2h內卻有明顯增高。筆者認為,標本放置時間過長會導致細胞分層, 分層的細胞會產生不同的代謝物,形成微環境,此時, 細胞的體積與其周圍的微環境相適應, 重新混勻后需重新建立平衡, 最初的1~ 2min收縮,達到平衡約需30min。這一現象對血脂較高的標本影響更為顯著。
測定時間對血小板的影響更為顯著,在一定的時間段內, 隨著時間的延長, 抗凝劑與血液充分溶融, 松散聚集的血小板逐步解聚,血小板數值逐步升高。實際操作中, 由于急需報告結果(尤其是急診標本) 而使待測時間縮短, 往往導致血小板計數結果偏低。
4 生理和病理因素的干擾
在臨床實踐中,筆者有時會發現應用血細胞儀對新生兒血液進行分析時,使用正常量溶血劑計數白細胞, 各項結果與實際有差異。筆者認為, 由于新生兒處于特殊的生理缺氧狀態,其紅細胞數和血紅蛋白都高( Hb> 200g/ L)。常規溶血劑用量不能將紅細胞完全破壞, 加大溶血劑用量, 可以使白細胞正確分類, 計數準確。因此, 在新生兒血液分析中掌握好溶血劑用量是獲得可靠結果的關鍵。
病理因素也可影響血液分析的結果, 在某些疾病的影響下,當平均紅細胞體積小于70fL時,血小板計數假性升高, 這時需用顯微鏡人工計數才能得到準確的結果。
5 采血因素的影響
【關鍵詞】 血細胞計數;自動分析;偏差;對比研究
本所檢驗科于2007年1月購入1臺XS21000i血細胞分析儀,與原有的邁瑞BC3000和貝克曼COULT同時使用,為了保證3種儀器測定結果的準確性和可比性,本文參照斯德哥爾摩協議的EP29A文件]要求,以參加衛生部臨床檢驗中心室間質評成績合格的貝克曼COULT血細胞分析儀為實現準確度溯源和可比性的目標,即參比儀器,以BC23000和XS21000i為比較檢測儀器,即測定儀器,在3種儀器上同時檢測患者新鮮標本。通過F檢驗和線性回歸分析,計算參比儀器和測定儀器之間的偏差來判斷結果是否準確,報道如下。
1 材料與方法
1.1 標本來源 取健康檢查者乙二胺四乙酸二鉀抗凝全血,白細胞(WBC)、紅細胞(RBC)、血紅蛋白(Hb)、血小板(PLT)4個項目分別為高、中、低值標本40份,每天選取8份。
1.2 儀器與試劑 貝克曼COULT血細胞分析儀、希森美康XS21000i血細胞分析儀、邁瑞BC3000血細胞分析儀,3種儀器所用試劑均為各公司原裝配套試劑。
1.3 實驗條件 各儀器均按使用說明定期維護、保養,每天開機后進行空白允許值及各自質控檢測,保證3種儀器均在控。
1.4 實驗方法 由技術熟練者分5 d,每天8份標本,每份標本在每臺儀器上檢測2次,取值為測定結果。2種儀器的檢測模式均為全血模式。
1.5 統計學方法 采用F檢驗,數據以均數±標準差(x±s)表示,直線回歸分析,統計軟件用SPSS13.0和Excel。
2 結果
3種儀器4項血細胞檢測結果及不同儀器間檢測結果的相關分析及偏差評估如下。
2.1 4 個項目3 種儀器測定結果比較
2.2 COUL T 和BC3000 的相關關系(r 表示相關系數)
3 討論
醫院檢驗科一般都同時使用多臺不同型號的血細胞分析儀進行標本檢測分析,各儀器都有各自獨立的試劑系統和質控系統,以質控物對血細胞分析儀進行測定只是了解單臺儀器,測定結果,而各自專用的全血定值質控物不能相互使用,無法反映各儀器檢測結果的一致性。本文參照NCCLS2EP9A方案,以參加衛生部臨床檢驗中心室間質評成績合格的COULT為參比儀器,以BC23000和XS21000i為測定儀器進行比對測試。
根據測試結果,以COULT的結果為自變量X,分別以BC23000和XS21000i的結果為因變量Y,計算每臺儀器4個項目的相關系數(r)和回歸方程,以r2>0.95為相關性良好。本實驗數據的可接受性判斷可通過r或r2作粗略估計,如r和r2均>0.95,說明實驗數據分布范圍合適,直線回歸統計的斜率和截距可靠,實驗方法精密度較好。本實驗3種儀器
作者單位:721000西安鐵路疾病預防控制所寶雞分所
檢測的40份標本WBC、RBC、Hb3個項目結果相關性密切(r>0.976),PLT欠佳,但差異無統計學意義,可同時或交替使用,與文獻報道相符[1,2]。根據回歸方程計算各參數在給定醫學決定水平(Xc)處的預期偏差和相對偏差,以不同Xc允許誤差的限值與預期偏差值判斷各項目的偏差是否可以接受。參照衛生部臨床檢驗中心推薦采用的參考方法的允許偏差范圍,WBC、RBC、Hb、PLT分別為靶值±15%、±6%、±7%、±25%[1],表明BC23000和XS21000i4個項目檢測結果的偏差均在允許范圍,檢測結果是一致的,具有可比性,完全符合臨床需要。
根據國際血液標準化委員會文件要求,血細胞分析儀的檢測結果必須直接或間接溯源至參考方法[2]才能保證結果的準確性和不同實驗室檢測結果的可比性。本研究用作比對的參比儀器是參加衛生部臨床檢驗中心室間質評合格的COULT,由于衛生部臨床檢驗中心為國家實驗室認可委員會認可的校準實驗室,因此,本文的檢測結果間接地溯源至參考方法。
參 考 文 獻
[1] 彭黎明,鄧瑞雪.血細胞自動分析比對的溯源.中華檢驗醫學雜志,2005,28(5):475-477.