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摘要：目的：探討新輔助化療對(duì)乳腺癌超微結(jié)構(gòu)的影響。方法：應(yīng)用電鏡觀察20例新輔助化療組和20例對(duì)照組乳腺癌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化。結(jié)果：新輔助化療組腫瘤細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)示有不同程度的細(xì)胞毒性損傷，新輔助化療組和對(duì)照組線粒體數(shù)量、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)數(shù)量差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論:新輔助化療可使乳腺癌細(xì)胞線粒體損傷數(shù)量減少,形態(tài)發(fā)生改變;使粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脫顆粒,受損減少。

關(guān)鍵詞：乳腺癌；新輔助化療；超微結(jié)構(gòu)

乳腺癌是危害婦女健康的主要惡性腫瘤之一，在我國(guó)乳腺癌已躍居城市女性惡性腫瘤的第1～2位，且有發(fā)病年齡低、早期發(fā)現(xiàn)少的特點(diǎn)。新輔助化療最早由1987年Frei命名，是指在施行手術(shù)或放療前應(yīng)用的全身性化療，又稱(chēng)為術(shù)前化療、初始化療和誘導(dǎo)化療，目前已成為局部晚期乳腺癌的標(biāo)準(zhǔn)治療[1]，在較早期可手術(shù)乳腺癌中的應(yīng)用也是目前的研究熱點(diǎn)之一。我們對(duì)采用新輔助化療后手術(shù)患者和單純手術(shù)患者乳腺癌細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察比較，對(duì)其有特征意義的線粒體、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)進(jìn)行數(shù)量和形態(tài)上的統(tǒng)計(jì)分析，為新輔助化療的基礎(chǔ)理論和臨床應(yīng)用探討提供科學(xué)依據(jù)。

1資料與方法

1.1臨床資料收集2005年1月~2006年8月在南通大學(xué)附屬醫(yī)院普外科住院的乳腺癌患者共40例，均為女性，年齡34~78歲，中位年齡56歲。所有患者術(shù)前均經(jīng)粗針穿刺獲組織學(xué)檢查證實(shí)為浸潤(rùn)癌，40例患者心、肝、肺、腎功能及血象基本正常，既往未經(jīng)放、化療及內(nèi)分泌治療。將上述患者隨機(jī)分為新輔助化療組及對(duì)照組。術(shù)前均接受CEF方案（環(huán)磷酰胺600mg/m2,表阿霉素50mg/m2,5氟尿嘧啶500mg/m2）,21天為1個(gè)周期，化療3個(gè)周期后行保乳手術(shù)3例，行乳腺癌改良根治術(shù)17例。對(duì)照組患者均行乳腺癌改良根治術(shù)。

1.2方法將所取新鮮標(biāo)本切成約1mm3小塊，分別經(jīng)過(guò)固定、漂洗、脫水、浸透、包埋、切片、染色和光鏡下定位后，將制備的樣品在透射電鏡﹙日本電子株式會(huì)社JEM-1230透射電子顯微鏡﹚下觀察其超微結(jié)構(gòu)的改變，并對(duì)其有特征意義的線粒體、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)進(jìn)行數(shù)量和形態(tài)上的統(tǒng)計(jì)分析,采用Stata7.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)。

2結(jié)果

2.1兩組乳腺癌細(xì)胞電鏡表現(xiàn)（1）對(duì)照組可見(jiàn)癌細(xì)胞呈大片分布，癌巢分布現(xiàn)象明顯，有的細(xì)胞間有大間隙，腺管腔面微絨毛豐富，細(xì)胞內(nèi)線粒體及粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)豐富，核分裂相明顯（見(jiàn)圖1）。（2）新輔助化療組化療后腫瘤細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)示有不同程度的細(xì)胞毒性損傷，化療后腫瘤實(shí)質(zhì)和細(xì)胞數(shù)目明顯減少，代之以大量膠原纖維，細(xì)胞間距增大，各種膜性結(jié)構(gòu)出現(xiàn)裂隙，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)構(gòu)松散、脫顆粒，線粒體膜碎裂和空泡化。部分細(xì)胞壞死崩解，僅見(jiàn)核仁影和散落崩解的細(xì)胞漿、成片凝固蛋白，細(xì)胞內(nèi)線粒體腫脹，嵴不明顯，微絨毛減少，極少見(jiàn)核分裂相。在受損的腫瘤細(xì)胞周?chē)？梢?jiàn)淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞浸潤(rùn)，壞死灶中有較多的纖維母細(xì)胞和膠原纖維及散落脂滴，溶酶體增多（見(jiàn)圖2）。

2.2兩組線粒體和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)數(shù)量比較新輔助化療組和對(duì)照組隨機(jī)拍攝癌組織細(xì)胞，每組采用30帖12千倍電鏡照片行線粒體和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)密度測(cè)定。新輔助化療組線粒體數(shù)量和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)數(shù)量分別為5.24±1.36、3.31±0.22，對(duì)照組分別為11.26±3.24、6.40±0.78，兩組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

3討論

隨著對(duì)乳腺癌研究的不斷深入，對(duì)其生物學(xué)特性有了進(jìn)一步的認(rèn)識(shí)，新輔助化療已成為乳腺癌研究重點(diǎn)之一。我們通過(guò)近幾年來(lái)乳腺癌術(shù)前新輔助化療，發(fā)現(xiàn)它具有以下幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)：（1）使腫瘤在術(shù)前減小，有利于手術(shù)；（2）殺滅存在于全身的轉(zhuǎn)移腫瘤細(xì)胞，防止其繼續(xù)生長(zhǎng)擴(kuò)散；（3）避免原發(fā)病灶切除后因體內(nèi)腫瘤細(xì)胞總數(shù)減少而加速生長(zhǎng)；（4）減少術(shù)中血行擴(kuò)散；（5）通過(guò)切除腫瘤標(biāo)本可準(zhǔn)確獲知患者對(duì)術(shù)前化療的藥物敏感性，以指導(dǎo)術(shù)后化療。

近年來(lái)國(guó)內(nèi)外學(xué)者發(fā)現(xiàn)放化療后腫瘤細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)上發(fā)生了一系列改變，主要變化為：腫瘤細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)嚴(yán)重破壞，在各種膜性結(jié)構(gòu)上出現(xiàn)裂隙，核漿的密度丟失，在核膜邊緣可見(jiàn)粗大染色質(zhì)顆粒的聚積[2]；腫瘤組織中可見(jiàn)大量壞死癌細(xì)胞，細(xì)胞結(jié)構(gòu)大部分消失，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)構(gòu)松散脫粒，線粒體空泡化或出現(xiàn)絮狀物，細(xì)胞微絨毛消失，可見(jiàn)大量肌纖維母細(xì)胞及淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)[3]；腫瘤細(xì)胞稀疏，變性及碎裂多見(jiàn)，核密度增高，血管內(nèi)皮細(xì)胞空泡變性，線粒體腫脹、溶解，溶酶體減少[4]。

本研究對(duì)乳腺癌患者新輔助化療后腫瘤細(xì)胞顯微結(jié)構(gòu)的觀察結(jié)果與以往的報(bào)道相近，證實(shí)新輔助化療作為一種術(shù)前療法有其科學(xué)性和實(shí)用性，但由于本研究在短期內(nèi)對(duì)乳腺癌患者新輔助化療效果進(jìn)行評(píng)價(jià)，且病例數(shù)較少，若能廣泛應(yīng)用于臨床，進(jìn)行大宗樣本分析，建立長(zhǎng)時(shí)間的隨訪，總結(jié)出超微結(jié)構(gòu)變化與預(yù)后之間關(guān)系的規(guī)律，其結(jié)果將更有意義。

【參考文獻(xiàn)】

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