1998年的專(zhuān)業(yè)目錄在十二個(gè)學(xué)科門(mén)類(lèi)下設(shè)二級(jí)類(lèi)71個(gè)，把專(zhuān)業(yè)種數(shù)由504種減少至249種，調(diào)減幅度為50.6%，藝術(shù)類(lèi)中其他學(xué)科的專(zhuān)業(yè)種數(shù)也只是減少了一半。但是，卻把隨著改革開(kāi)放而方興未艾的我國(guó)產(chǎn)業(yè)發(fā)展急需的，"既有自然科學(xué)特征又有人文學(xué)科色彩的"，招生總量占藝術(shù)類(lèi)60%以上的裝潢藝術(shù)設(shè)計(jì)、染織藝術(shù)設(shè)計(jì)、陶瓷藝術(shù)設(shè)計(jì)、室內(nèi)與家具設(shè)計(jì)（部分）、裝飾藝術(shù)設(shè)計(jì)、環(huán)境藝術(shù)設(shè)計(jì)、服裝藝術(shù)設(shè)計(jì)（部分）等7種專(zhuān)業(yè)，一股腦合并為"藝術(shù)設(shè)計(jì)"一個(gè)專(zhuān)業(yè)。

且不論隨著我國(guó)改革開(kāi)放，這些年這些專(zhuān)業(yè)的發(fā)展和社會(huì)的需求，就算與其他學(xué)科門(mén)類(lèi)同步"調(diào)減"，也沒(méi)有必要非把7個(gè)專(zhuān)業(yè)變?yōu)橐粋€(gè)專(zhuān)業(yè)。使得各個(gè)學(xué)校都很無(wú)奈，不得不按"專(zhuān)業(yè)方向"招生和組織教學(xué)。這種"改革"完全是倒行逆施，是對(duì)世界現(xiàn)代設(shè)計(jì)100多年各專(zhuān)業(yè)形成發(fā)展?fàn)顩r的無(wú)知或漠視。因?yàn)榛煜藢?zhuān)業(yè)特性，在業(yè)內(nèi)外無(wú)論對(duì)剛剛從西方吸收引進(jìn)本應(yīng)快速發(fā)展的專(zhuān)業(yè)，還是對(duì)陶瓷、染織等富有中國(guó)悠久傳統(tǒng)的專(zhuān)業(yè)，都產(chǎn)生了極為嚴(yán)重的負(fù)面影響，也極大地挫傷了專(zhuān)業(yè)教師的積極性。面對(duì)這種局面，居然還有"專(zhuān)業(yè)人士"閉著眼睛大唱贊歌，以至教育部從2001年起逐年批準(zhǔn)新增目錄外專(zhuān)業(yè)和部分院校試點(diǎn)專(zhuān)業(yè)，到現(xiàn)在專(zhuān)業(yè)種數(shù)已經(jīng)超出"調(diào)減"之前了，惟獨(dú)這7種專(zhuān)業(yè)未能夠得以正名。

也正因?yàn)?藝術(shù)設(shè)計(jì)"只被視為一個(gè)專(zhuān)業(yè)，教育部近期制訂的《普通高等教育十一五國(guó)家級(jí)教材規(guī)劃申報(bào)指南》，對(duì)于藝術(shù)類(lèi)"藝術(shù)設(shè)計(jì)"專(zhuān)業(yè)只有兩門(mén)課程（藝術(shù)設(shè)計(jì)導(dǎo)論、現(xiàn)代藝術(shù)設(shè)計(jì)思潮）。而《展示設(shè)計(jì)》、《產(chǎn)品包裝設(shè)計(jì)》都是歷來(lái)被認(rèn)為是視覺(jué)傳達(dá)專(zhuān)業(yè)的學(xué)科方向課程，還有其他幾門(mén)藝術(shù)設(shè)計(jì)專(zhuān)業(yè)的學(xué)科方向課程，卻規(guī)劃在工學(xué)門(mén)類(lèi)里面。學(xué)科分類(lèi)的不科學(xué)和設(shè)計(jì)專(zhuān)業(yè)合并帶來(lái)的弊端展現(xiàn)在許多方面。

把業(yè)內(nèi)外都能分辨的不應(yīng)合并的7個(gè)專(zhuān)業(yè)合并了，卻又批準(zhǔn)設(shè)立了裝潢設(shè)計(jì)與工藝教育、服裝設(shè)計(jì)與工藝教育、會(huì)展藝術(shù)與技術(shù)等專(zhuān)業(yè)。難道培養(yǎng)教師的專(zhuān)業(yè)面"窄"可以，培養(yǎng)職業(yè)設(shè)計(jì)師的專(zhuān)業(yè)面則必須"拓寬"？"會(huì)展藝術(shù)與技術(shù)"，這種名稱(chēng)的專(zhuān)業(yè)為什么就沒(méi)有人覺(jué)得"窄"了呢？多年來(lái)，裝潢（視覺(jué)傳達(dá)）設(shè)計(jì)"專(zhuān)業(yè)方向"的許多畢業(yè)生也在從事這項(xiàng)專(zhuān)門(mén)工作，為什么長(zhǎng)期以來(lái)就不能在視覺(jué)傳達(dá)設(shè)計(jì)學(xué)科開(kāi)設(shè)這一專(zhuān)業(yè)或?qū)I(yè)方向呢？設(shè)計(jì)類(lèi)各個(gè)專(zhuān)業(yè)從一出現(xiàn)就是與相關(guān)的并且不斷發(fā)展的工藝、技術(shù)密不可分的。西方從100年之前，視覺(jué)傳達(dá)設(shè)計(jì)教育就是按專(zhuān)業(yè)所需知識(shí)結(jié)構(gòu)（包括藝術(shù)與技術(shù)層面）對(duì)學(xué)生進(jìn)行培養(yǎng)的。

誠(chéng)然，剛剛過(guò)去的20世紀(jì)，除了自然科學(xué)還在向縱深發(fā)展，藝術(shù)設(shè)計(jì)及許多人文社會(huì)科學(xué)學(xué)科的發(fā)展，則更多的表現(xiàn)在與其它學(xué)科的交叉交融上。但是，藝術(shù)設(shè)計(jì)各個(gè)專(zhuān)業(yè)與其它學(xué)科的交叉交融發(fā)展，并不應(yīng)當(dāng)限制在學(xué)科內(nèi)，這些專(zhuān)業(yè)的相互影響與相互促進(jìn)是歷史形成的。藝術(shù)設(shè)計(jì)各個(gè)專(zhuān)業(yè)的發(fā)展，應(yīng)當(dāng)也必然體現(xiàn)與各自相關(guān)聯(lián)的其他學(xué)科專(zhuān)業(yè)的交叉交融，造就適應(yīng)快速發(fā)展的各行各業(yè)對(duì)專(zhuān)門(mén)藝術(shù)設(shè)計(jì)所需要的人才。"服裝設(shè)計(jì)與工程專(zhuān)業(yè)"、"包裝工程與設(shè)計(jì)"等專(zhuān)業(yè)，就是符合當(dāng)今和日后細(xì)分市場(chǎng)需要應(yīng)運(yùn)而生的。但是，目前這些專(zhuān)業(yè)依托在工學(xué)門(mén)類(lèi)，是舍本逐末之舉。中國(guó)本土產(chǎn)業(yè)進(jìn)步的根本出路在于"中國(guó)設(shè)計(jì)"，僅僅滿(mǎn)足于"Made*in*China"是不夠的。"設(shè)計(jì)"是有別于"制造"概念的，前者是對(duì)未知領(lǐng)域的開(kāi)拓和新的物象、形態(tài)、可能的創(chuàng)意發(fā)現(xiàn)，而后者只是對(duì)這些開(kāi)拓和發(fā)現(xiàn)結(jié)果的批量加工復(fù)制。滿(mǎn)足"中國(guó)設(shè)計(jì)"需要的設(shè)計(jì)師，對(duì)相關(guān)產(chǎn)業(yè)技術(shù)的了解和熟悉固然重要，但是對(duì)設(shè)計(jì)師的創(chuàng)造力培養(yǎng)仍然還是第一位的。

2.前景：日益細(xì)分的職場(chǎng)需要與產(chǎn)業(yè)技術(shù)進(jìn)步結(jié)合的各種復(fù)合型專(zhuān)業(yè)人才

1．醫(yī)學(xué)方面計(jì)算機(jī)利用

電子計(jì)算機(jī)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用開(kāi)始于本世紀(jì)50年代末，經(jīng)過(guò)幾十年的發(fā)展，已深入醫(yī)學(xué)各個(gè)領(lǐng)域。從臨床醫(yī)學(xué)、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)到預(yù)防醫(yī)學(xué)，從醫(yī)療、科研、教學(xué)、醫(yī)學(xué)情報(bào)檢索到醫(yī)院的科學(xué)管理，都在不同程度上使用計(jì)算機(jī)。微處理機(jī)、專(zhuān)用機(jī)、小型機(jī)、計(jì)算機(jī)網(wǎng)絡(luò)及計(jì)算機(jī)軟件成為醫(yī)學(xué)發(fā)展的不可或缺的組成部分。目前，在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)方面利用計(jì)算機(jī)聯(lián)機(jī)處理各種醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)信息、模擬生物和生理系統(tǒng)，對(duì)研究生物的微觀結(jié)構(gòu)、神經(jīng)活動(dòng)、癌細(xì)胞的發(fā)生機(jī)理等，起到促進(jìn)作用。在預(yù)防醫(yī)學(xué)和公共衛(wèi)生方面采用計(jì)算機(jī)實(shí)現(xiàn)了體檢自動(dòng)化，利用計(jì)算機(jī)模擬流行性疾病的蔓延及防治研究等。在醫(yī)院綜合管理方面利用醫(yī)療信息系統(tǒng)對(duì)醫(yī)學(xué)進(jìn)行綜合管理，完善病歷存儲(chǔ)、藥品管理、財(cái)務(wù)管理、辦公信息化等，大大提高了醫(yī)院的管理水平。下面介紹一些計(jì)算機(jī)在醫(yī)學(xué)上的實(shí)際應(yīng)用。

2．利用計(jì)算機(jī)處理醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)信息

數(shù)值計(jì)算是計(jì)算機(jī)應(yīng)用的基礎(chǔ)，較早應(yīng)用于生物化學(xué)和分子生物學(xué)方面，統(tǒng)計(jì)分析各種臨床及生物醫(yī)學(xué)數(shù)據(jù)也是數(shù)值計(jì)算。由于生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)和臨床診斷都是從人體或生物體上取得信號(hào)，這些信號(hào)具有信號(hào)微弱、干擾大、信噪比低及遵循統(tǒng)計(jì)學(xué)規(guī)律的特點(diǎn)，因而疊加法、直方圖、頻譜分析等各種統(tǒng)計(jì)分析的方法應(yīng)用較多。在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中，人體的許多生理信號(hào)，如心電波、腦電波、脈波、心音、呼吸頻率乃至一晝夜間正常人的體溫等等都是近似于周期性的，存在著相應(yīng)的頻譜。其中某些參數(shù)的頻譜分析在醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷中有實(shí)際意義。如果我們掌握了各種生理信息的頻譜，就可以通過(guò)計(jì)算機(jī)來(lái)模擬它們，這在教學(xué)、科研和臨床上都有實(shí)際意義。模擬標(biāo)準(zhǔn)的心電信號(hào)在計(jì)算機(jī)診斷和監(jiān)護(hù)系統(tǒng)中是十分重要的，它是判別心電異常的依據(jù)[1]。

3．應(yīng)用計(jì)算機(jī)進(jìn)行輔助診斷

計(jì)算機(jī)輔助診斷實(shí)際上是把大量的醫(yī)學(xué)資料和醫(yī)生的豐富經(jīng)驗(yàn)，以電子數(shù)據(jù)的形式匯總存貯，并隨著醫(yī)學(xué)的發(fā)展不斷更新完善。計(jì)算機(jī)處理數(shù)據(jù)的精確、覆蓋面廣泛、無(wú)間斷性等特點(diǎn)使電子計(jì)算機(jī)進(jìn)行輔助診斷具有重要意義。例如體表標(biāo)測(cè)心電圖即采用體表多電極同時(shí)記錄體表各部位心臟激動(dòng)造成的電位差，早在五十年代就有人進(jìn)行研究，但最終因工作難度太大而中斷。近些年，電子計(jì)算機(jī)自動(dòng)采集體表眾多部位的各瞬時(shí)電位變化，進(jìn)行分析處理，繪制成等位標(biāo)測(cè)圖，它能獲得比常規(guī)心電圖或心電向量圖更豐富的信息，有助于認(rèn)識(shí)心臟激動(dòng)的空間電位分布和體表電位分布的關(guān)系。在婦產(chǎn)科領(lǐng)域，英國(guó)普利茅茨醫(yī)學(xué)院研究生院婦產(chǎn)科keith開(kāi)發(fā)了智能胎心率與宮縮描記圖（cardiotocography，CTG）計(jì)算機(jī)輔助分析系統(tǒng)。

按照礦區(qū)黨委的統(tǒng)一部署和安排,根據(jù)我院深入學(xué)習(xí)實(shí)踐科學(xué)發(fā)展觀活動(dòng)第一階段工作的要求,為了搞好深入學(xué)習(xí)實(shí)踐科學(xué)發(fā)展觀活動(dòng)，全面掌握醫(yī)院發(fā)展的現(xiàn)狀，找準(zhǔn)制約發(fā)展的瓶頸，尋求快速發(fā)展的突破口，進(jìn)一步謀劃和理清發(fā)展思路，做到有的放矢，院黨總支積極行動(dòng),認(rèn)真制定調(diào)研方案,確定調(diào)研內(nèi)容，3月27日，院領(lǐng)導(dǎo)班子分成三個(gè)小組分別深入基層開(kāi)展調(diào)研,現(xiàn)將調(diào)研情況報(bào)告如下:

一、學(xué)習(xí)實(shí)踐活動(dòng)主要做法及收到的成效

科學(xué)發(fā)展觀是醫(yī)院工作必須長(zhǎng)期堅(jiān)持的指導(dǎo)思想，也是解決當(dāng)前和今后一個(gè)時(shí)期醫(yī)院發(fā)展過(guò)程中各種新矛盾、新問(wèn)題的基本原則。作為醫(yī)療服務(wù)保障單位，如何提高全體員工的科學(xué)發(fā)展能力，不斷提高醫(yī)療服務(wù)質(zhì)量和服務(wù)水平，加快推進(jìn)“一流社區(qū)醫(yī)療服務(wù)品牌”建設(shè)，是當(dāng)前必須認(rèn)真思考和實(shí)踐的重要課題。我院結(jié)合實(shí)際，以開(kāi)展深入學(xué)習(xí)實(shí)踐科學(xué)發(fā)展觀活動(dòng)為契機(jī)，以“提高思想認(rèn)識(shí)、解決突出問(wèn)題、創(chuàng)新體制機(jī)制、促進(jìn)科學(xué)發(fā)展”為目標(biāo)，著力轉(zhuǎn)變黨員干部不適應(yīng)、不符合科學(xué)發(fā)展要求的思想觀念，著力解決影響和制約醫(yī)院科學(xué)發(fā)展的突出問(wèn)題，不斷提高醫(yī)療服務(wù)質(zhì)量，推動(dòng)醫(yī)院又好又快發(fā)展。

主要做法：學(xué)習(xí)實(shí)踐活動(dòng)緊緊圍繞醫(yī)院中心工作，做到“三個(gè)結(jié)合”。一是與日常工作相結(jié)合。把活動(dòng)作為提高工作、服務(wù)上水平的出發(fā)點(diǎn)和落腳點(diǎn)，在工作中學(xué)習(xí)，在學(xué)習(xí)中工作，做到工作、學(xué)習(xí)“兩不誤、兩促進(jìn)”。二是與創(chuàng)建“五型班組”，加強(qiáng)基層建設(shè)工作相結(jié)合。進(jìn)一步理順科室管理制度、崗位流程，加強(qiáng)科室規(guī)范化管理，促進(jìn)各項(xiàng)工作上水平。三是與安全環(huán)保、節(jié)能減排工作相結(jié)合。嚴(yán)格執(zhí)行“六條禁令”、“HSE管理原則”，大力開(kāi)展控投降本工作、節(jié)支增效活動(dòng)，爭(zhēng)取09年創(chuàng)收工作較去年有所提高。黨員干部要通過(guò)學(xué)習(xí)實(shí)踐活動(dòng)做到“學(xué)習(xí)走在先、工作干在先、服務(wù)做在先、幫扶搶在先”“四個(gè)先”。通過(guò)學(xué)習(xí)實(shí)踐活動(dòng)使我院醫(yī)療服務(wù)質(zhì)量、服務(wù)水平上臺(tái)階。

收到的成效：一是統(tǒng)一思想，凝聚人心。通過(guò)深入開(kāi)展學(xué)習(xí)實(shí)踐科學(xué)發(fā)展觀活動(dòng)，全院職工，尤其是黨員領(lǐng)導(dǎo)干部強(qiáng)化了求真務(wù)實(shí)的意識(shí)，服務(wù)意識(shí)不斷增強(qiáng)，科學(xué)管理水平和科學(xué)發(fā)展能力不斷提高，進(jìn)而統(tǒng)一了思想，凝聚了人心。

二是激發(fā)了活力,鼓足了干勁。通過(guò)深入學(xué)習(xí)實(shí)踐科學(xué)發(fā)展觀活動(dòng)，全面提高了廣大黨員領(lǐng)導(dǎo)干部的整體素質(zhì)，牢固樹(shù)立起正確的政績(jī)觀，進(jìn)一步增強(qiáng)了群眾觀念，鼓足了干勁，為推動(dòng)醫(yī)院全面可持續(xù)發(fā)展努力工作。

【摘要】目的分析小連翹(HyperioumssampsoniiHance)內(nèi)生真菌的分布特征和抗菌活性。方法采用內(nèi)生菌分離法分離菌株，雙培養(yǎng)法對(duì)峙試驗(yàn)測(cè)定其抗菌性。結(jié)果從小連翹的根、莖、葉等不同的器官中分離得到81株內(nèi)生真菌，經(jīng)形態(tài)學(xué)分類(lèi)鑒定分屬于4個(gè)目，5個(gè)科，26個(gè)屬，其中頭孢霉屬（Cephalosporiumsp.）和絲核菌屬（Rhizoctoniasp.）為優(yōu)勢(shì)菌群。不同部位內(nèi)生真菌的類(lèi)型、數(shù)量和分布存在差異，根部有31株，分屬于12屬；莖部有12株，分屬于10屬；葉部有38株，分屬于13屬。通過(guò)平板對(duì)峙實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，從小連翹所分離的內(nèi)生真菌中54.32%對(duì)某些植物病原真菌有拮抗活性。結(jié)論小連翹內(nèi)生真菌及其代謝產(chǎn)物中具有潛在活性物質(zhì)，值得深入研究。

【關(guān)鍵詞】?jī)?nèi)生真菌；小連翹；拮抗活性

StudiesoncommunitiesofendophyticfungifromHyperioumssampsoniiHanceandtheirantipathogenicactivitiesinvitro

Abstract:Theendophyticfungiwereisolatedandidentifiedmorphologicallyfromtheroots,stemsandleavesofHyperioumsSampsoniiHance.Eightyonestrainsofendophyticfungiwereisolatedandbelongedto26genera,5familiesand4orders.Cephalosporiumsp.andRhizoctoniasp.werethedominantgenera.Among81strains,31strainsof12generawereisolatedinroots,12strainsof10generainstems,and38strainsof13generainleaves.Theresultsshowedthatthequantity,population,anddistributionoftheendophyticfungivariedindifferentpositionsofHyperioumsSampsoniiHance.Inthedualculturetests,53.48%ofalltheisolatedEndophyticfungishowedantagonistictosomeplantpathogens.Theseendophyticfungiinsidetheplantshaveintimatecorrelationwiththeirhosts.Theseendophyticfungiandtheirmetabolitesmightplayanimportantroleintheplantsagainstthepathogens.

Keywords:endophyticfungi;HyperioumsSampsoniiHance;antipathogenicactivities

小連翹(HyperioumssampsoniiHance)，別名小翹、七層蘭、瑞香草、元寶草等，為多年生雙子葉植物藥藤黃科植物，味苦、性辛、平［1］。全草含鞣質(zhì)，有光致敏作用，動(dòng)物食后可產(chǎn)生皮炎；含小連翹堿(hypecorine)和小連翹次堿(hypecorinine)；花含金絲桃素(hepericin)［2］，有活血、止痛、調(diào)經(jīng)、止血、消腫之效；小連翹或其提取物作為有效藥物成分用于制備治療睡眠障礙、老年癡呆、記憶力減退等病癥的藥物［3］；同屬植物貫葉連翹，在西方國(guó)家稱(chēng)圣約翰草，用于治療憂(yōu)郁癥等疾病已有幾百年的歷史［4］。近年來(lái)的研究表明小連翹也具有抗憂(yōu)郁作用［5］。文獻(xiàn)報(bào)道，小連翹中含有聚（異）戊二烯二苯甲酮類(lèi)衍生物、萘駢雙蒽酮類(lèi)和黃酮類(lèi)等多種化學(xué)成分，這些成分是小連翹藥理作用的主要有效成分，但是要提取和分離這些藥物成分還有很多困難［6］。近來(lái)研究表明,某些藥用植物中個(gè)別內(nèi)生真菌能夠產(chǎn)生與宿主相同或者相似藥理活性的成分［7］，由此對(duì)藥用植物內(nèi)生真菌的研究引起人們的廣泛關(guān)注。如果在小連翹內(nèi)生真菌中能夠發(fā)現(xiàn)類(lèi)似的活性物質(zhì)，無(wú)疑找到了一種可替代小連翹植物的新型生物資源。但是至今未見(jiàn)從小連翹中分離及其內(nèi)生真菌的種群多樣性的研究報(bào)道。本文對(duì)小連翹內(nèi)生真菌進(jìn)行了分離和分類(lèi)鑒定，并對(duì)其種群多樣性及內(nèi)生真菌拮抗病原菌的活性的研究報(bào)道如下。

【摘要】目的分析小連翹(HyperioumssampsoniiHance)內(nèi)生真菌的分布特征和抗菌活性。方法采用內(nèi)生菌分離法分離菌株，雙培養(yǎng)法對(duì)峙試驗(yàn)測(cè)定其抗菌性。結(jié)果從小連翹的根、莖、葉等不同的器官中分離得到81株內(nèi)生真菌，經(jīng)形態(tài)學(xué)分類(lèi)鑒定分屬于4個(gè)目，5個(gè)科，26個(gè)屬，其中頭孢霉屬（Cephalosporiumsp.）和絲核菌屬（Rhizoctoniasp.）為優(yōu)勢(shì)菌群。不同部位內(nèi)生真菌的類(lèi)型、數(shù)量和分布存在差異，根部有31株，分屬于12屬；莖部有12株，分屬于10屬；葉部有38株，分屬于13屬。通過(guò)平板對(duì)峙實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，從小連翹所分離的內(nèi)生真菌中54.32%對(duì)某些植物病原真菌有拮抗活性。結(jié)論小連翹內(nèi)生真菌及其代謝產(chǎn)物中具有潛在活性物質(zhì)，值得深入研究。【關(guān)鍵詞】?jī)?nèi)生真菌；小連翹；拮抗活性StudiesoncommunitiesofendophyticfungifromHyperioumssampsoniiHanceandtheirantipathogenicactivitiesinvitroAbstract:Theendophyticfungiwereisolatedandidentifiedmorphologicallyfromtheroots,stemsandleavesofHyperioumsSampsoniiHance.Eightyonestrainsofendophyticfungiwereisolatedandbelongedto26genera,5familiesand4orders.Cephalosporiumsp.andRhizoctoniasp.werethedominantgenera.Among81strains,31strainsof12generawereisolatedinroots,12strainsof10generainstems,and38strainsof13generainleaves.Theresultsshowedthatthequantity,population,anddistributionoftheendophyticfungivariedindifferentpositionsofHyperioumsSampsoniiHance.Inthedualculturetests,53.48%ofalltheisolatedEndophyticfungishowedantagonistictosomeplantpathogens.Theseendophyticfungiinsidetheplantshaveintimatecorrelationwiththeirhosts.Theseendophyticfungiandtheirmetabolitesmightplayanimportantroleintheplantsagainstthepathogens.Keywords:endophyticfungi;HyperioumsSampsoniiHance;antipathogenicactivities小連翹(HyperioumssampsoniiHance)，別名小翹、七層蘭、瑞香草、元寶草等，為多年生雙子葉植物藥藤黃科植物，味苦、性辛、平［1］。全草含鞣質(zhì)，有光致敏作用，動(dòng)物食后可產(chǎn)生皮炎；含小連翹堿(hypecorine)和小連翹次堿(hypecorinine)；花含金絲桃素(hepericin)［2］，有活血、止痛、調(diào)經(jīng)、止血、消腫之效；小連翹或其提取物作為有效藥物成分用于制備治療睡眠障礙、老年癡呆、記憶力減退等病癥的藥物［3］；同屬植物貫葉連翹，在西方國(guó)家稱(chēng)圣約翰草，用于治療憂(yōu)郁癥等疾病已有幾百年的歷史［4］。近年來(lái)的研究表明小連翹也具有抗憂(yōu)郁作用［5］。文獻(xiàn)報(bào)道，小連翹中含有聚（異）戊二烯二苯甲酮類(lèi)衍生物、萘駢雙蒽酮類(lèi)和黃酮類(lèi)等多種化學(xué)成分，這些成分是小連翹藥理作用的主要有效成分，但是要提取和分離這些藥物成分還有很多困難［6］。近來(lái)研究表明,某些藥用植物中個(gè)別內(nèi)生真菌能夠產(chǎn)生與宿主相同或者相似藥理活性的成分［7］，由此對(duì)藥用植物內(nèi)生真菌的研究引起人們的廣泛關(guān)注。如果在小連翹內(nèi)生真菌中能夠發(fā)現(xiàn)類(lèi)似的活性物質(zhì)，無(wú)疑找到了一種可替代小連翹植物的新型生物資源。但是至今未見(jiàn)從小連翹中分離及其內(nèi)生真菌的種群多樣性的研究報(bào)道。本文對(duì)小連翹內(nèi)生真菌進(jìn)行了分離和分類(lèi)鑒定，并對(duì)其種群多樣性及內(nèi)生真菌拮抗病原菌的活性的研究報(bào)道如下。1材料與方法1.1材料分離所用材料為小連翹的根、莖、葉，采自中國(guó)科學(xué)院華南植物園（廣州）。采集其健康的組織，無(wú)其它病蟲(chóng)害，根、莖與葉分開(kāi)采集，放于密封袋中，于4℃存放，盡快進(jìn)行內(nèi)生真菌的分離。碘伏：威的牌消毒液，主要成份是聚乙烯吡咯烷酮碘（即碘伏），液體劑型，有效碘含量為0.5%，是一種新型的PVP-I消毒劑，深圳市新華鵬消毒劑有限公司生產(chǎn)。NS液：0.9%NaCl；ST液：0.9%NaCl，0.5%吐溫80；中和劑：0.9%NaCl，0.5%吐溫80，0.5%硫代硫酸鈉。PDA培養(yǎng)基：馬鈴薯200g，葡萄糖20g，瓊脂20g，水1000mL，pH7.0。在進(jìn)行內(nèi)生真菌的分離時(shí)，向培養(yǎng)基中分別加入青霉素、鏈霉素至50μg/mL。1.2供試菌株紋枯病菌(Rhizoctoniasolani)、白葉枯病菌(Xanthomonasoryzaepv.Oryzae)、惡苗病菌(Fusariummoniliforme)、棉花枯萎病菌(Fusariumoxysporiumf.sp.vasinfectum)由中山大學(xué)生命科學(xué)院微生物和生化教研室提供。1.2方法1.2.1植物材料的處理樣品采于2005年10月。樣品用自來(lái)水沖洗干凈后，取不同部位的莖或葉若干，剪成小塊，分別放于三角瓶中；加入碘伏消毒液（使用時(shí)有效碘濃度為2500mg·L-1），不斷搖動(dòng)，消毒5min。吸去消毒液，加入無(wú)菌ST液，蕩洗1min，吸去液體。重復(fù)一次。經(jīng)表面消毒后的樣品可用于接種。1.2.2內(nèi)生真菌的分離、純化莖內(nèi)內(nèi)生真菌的接種：用無(wú)菌刀片削去莖的皮及已裸露的切面，然后切取約2～5mm的切片若干，先置于無(wú)菌平皿中。再將樣品置于無(wú)菌研缽中，加入石英砂和1mLST液，將樣品研成漿。取適量的漿液涂布于PDA平板。為了保證樣品有足夠的代表性，每個(gè)樣品要用若干段莖，一段莖僅涂一個(gè)平板，共需涂5～10個(gè)平板。根葉樣品的處理基本同莖。將涂布好的平板置于28℃培養(yǎng)，每隔12h觀察真菌菌落形成情況。培養(yǎng)基中一出現(xiàn)菌落，立即將此處的小塊瓊脂挖出，將平板再放回28℃培養(yǎng)10d，計(jì)數(shù)各平板上的菌落總數(shù)。挖出的含真菌的小塊PDA立即置于含PDA的小試管中培養(yǎng)，待真菌長(zhǎng)出后，再在PDA平板上采用菌絲頂端純化法逐步純化。待菌落出現(xiàn)后，根據(jù)菌落形態(tài)、顏色的差異以及長(zhǎng)出時(shí)間的不同，分別挑取各平板上的菌落邊緣的菌絲接于新的平板上進(jìn)行分離培養(yǎng)。在培養(yǎng)數(shù)日后，觀察菌落的形態(tài)及其菌落邊緣的整齊情況，并做相應(yīng)的記錄，包括影象記錄，對(duì)菌株編號(hào)后，轉(zhuǎn)至PDA斜面培養(yǎng)基上，于28℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5~7d，然后放入4℃冰箱保存。1.2.3表面消毒效果檢測(cè)表面消毒后的樣品于5mL無(wú)菌水中振蕩1min，取0.3mL懸液涂布于PDA平板上，在28℃培養(yǎng)，記錄是否有真菌生長(zhǎng)。另外，采用存活試驗(yàn)觀察表面消毒效果，即將分離的內(nèi)生真菌菌苔經(jīng)過(guò)各自表面消毒程序處理后，再接種到PDA平板28℃培養(yǎng)后，觀察是否生長(zhǎng)。1.2.4菌種鑒定從純化培養(yǎng)數(shù)日的菌落上挑取菌絲并連同分生孢子制成玻片，置于光學(xué)顯微鏡下觀察菌絲形態(tài)、孢子梗形態(tài)、孢子形態(tài)以及孢子與營(yíng)養(yǎng)體之間的著生關(guān)系，對(duì)照有關(guān)資料確定真菌的分類(lèi)學(xué)地位［8］。1.2.5對(duì)峙試驗(yàn)將4種植物病原菌(紋枯病菌、稻瘟病菌、白葉枯病菌、惡苗病菌)接種于平板中央，內(nèi)生真菌接種于平板邊緣，28℃培養(yǎng)，觀察病原菌菌落周?chē)淖兓?結(jié)果2.1表面消毒效果表面消毒后的樣品振蕩液0.3mL分別涂布于PDA平板培養(yǎng)基上，28℃培養(yǎng)2周后無(wú)菌落長(zhǎng)出，同時(shí)10株分離的代表性真菌菌苔分別經(jīng)過(guò)消毒過(guò)程處理后接種到PDA平板上，28℃培養(yǎng)2周后，沒(méi)有觀察到菌落生長(zhǎng)。表明經(jīng)過(guò)樣品消毒處理過(guò)程，樣品表面附生菌的影響已消除，分離的菌株來(lái)自于樣品內(nèi)部，與植物組織結(jié)合緊密。2.2小連翹內(nèi)生真菌種群組成從植物小連翹分離獲得內(nèi)生真菌共81株。經(jīng)顯微形態(tài)觀察鑒定為4個(gè)目，5個(gè)科，26個(gè)屬（見(jiàn)表1）。從表1可以看出，植物小連翹內(nèi)生真菌中，從目的分類(lèi)水平上以叢梗孢目(Moniliales)和無(wú)孢菌群(Myceliasterilia)為優(yōu)勢(shì)菌群，分別為50株和23株占總菌株數(shù)的61.7%和28.4%；在屬的分類(lèi)水平上以頭孢霉屬（Cephalosporiumsp.）和絲核菌屬（Rhizoctoniasp.）為優(yōu)勢(shì)菌群，分別為20株和16株，占總菌數(shù)的24.7%和19.7%。[1][2][][]2.3植物小連翹不同部位內(nèi)生真菌的分布對(duì)小連翹根莖葉內(nèi)生真菌的種類(lèi)，數(shù)目和分布部位進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果見(jiàn)表2。表1小連翹植物內(nèi)生真菌種群組成（略）Tab.1ThecomposingofendophyticfungiinHyperioumssampsoniiHance從表2中看出，從小連翹植株內(nèi)分離的81株內(nèi)生真菌的分布各有特點(diǎn)，根部分布有31株內(nèi)生真菌(占總數(shù)的38.2%)，隸屬于12個(gè)屬(占26個(gè)屬的46.2%)；莖部分布有12株內(nèi)生真菌(占總數(shù)的14.9%)，分屬于10個(gè)屬(占26個(gè)屬的38.5%)；從葉部分離出的38株內(nèi)生真菌(占總數(shù)的469%)，分屬于13個(gè)屬(占26個(gè)屬的50%)。由此可知，小連翹的內(nèi)生真菌主要存在于植株的葉和根中，莖部組織中分離到的內(nèi)生真菌相對(duì)較少。從根莖葉中分離到的內(nèi)生真菌的種屬分布來(lái)看，頭孢霉屬（Cephalosporiumsp.）在葉部、根部和莖部都有分布，說(shuō)明頭孢霉屬（Cephalosporiumsp.）不僅是葉部的優(yōu)勢(shì)種群，而且也是整株小連翹植物內(nèi)生真菌的優(yōu)勢(shì)種群。絲核菌屬（Rhizoctoniasp.）僅在根部分布，是根部的優(yōu)勢(shì)種群，占根部所有分離到的內(nèi)生真菌的51%。另外，短梗霉屬（Aureobasidiumsp.）、鞘孢霉屬（Chalarasp.）、束絲菌屬（Ozoniumsp.）也只在根部分布；而串珠孢霉屬（Moniliasp.）、曲霉屬（Aspergillussp.）、粘帚霉屬（Gliocladiumsp.）、痕格霉屬（Sirosporiumsp.）、彎孢霉屬（Curvulariasp.）、毛殼菌屬（Chaetoniumsp.）和直毛殼菌屬（Ascotrichasp.）的內(nèi)生真菌只在葉部分布，而葉組織內(nèi)生真菌的優(yōu)勢(shì)種也和根部不同，頭孢霉屬和痕格霉屬內(nèi)生真菌是葉部的優(yōu)勢(shì)菌群；從莖部分離的內(nèi)生真菌的優(yōu)勢(shì)菌群不明顯，其中分離到的木霉屬（Trichodermasp.）、黑孢霉屬（Nigrosporasp.）、芽枝霉屬（Cladosporiumsp.）內(nèi)生真菌只在莖部分布。結(jié)果表明，小連翹根莖葉組織的不同部位所分離到的內(nèi)生真菌的數(shù)量不同，所分離到內(nèi)生真菌的分布和優(yōu)勢(shì)種群也存有差異。表2小連翹植物內(nèi)生真菌數(shù)量與分布（略）Tab.2ThenumberanddistributionofendophyticfungispeciesinHyperioumssampsoniiHance2.4內(nèi)生真菌對(duì)植物病原菌的拮抗作用通過(guò)平板對(duì)峙試驗(yàn)分別對(duì)從小連翹中所分離的81株菌對(duì)植物病原菌紋枯病菌（立枯絲核菌）(Rhizoctoniasolani)、白葉枯病菌(Xanthomonasoryzaepv.Oryzae)、惡苗病菌(Fusariummoniliforme)、棉花枯萎病菌(Fusariumoxysporiumf.sp.vasinfectum)的抑菌活性進(jìn)行測(cè)定（圖1）。結(jié)果發(fā)現(xiàn),從小連翹中分離的81株內(nèi)生真菌中共有53株對(duì)一種或多種病原菌有拮抗作用(占總分離株數(shù)的52.48%)。其中對(duì)惡苗病菌有抑菌作用的有23株，對(duì)白葉枯病菌有抑菌作用的18株,對(duì)紋枯病菌有抑菌作用的有12株，對(duì)棉花枯萎病菌有抑菌作用的有4株。這表明多數(shù)小連翹內(nèi)生真菌具有抗植物病原菌的功能，在小連翹中存在著廣泛的抗菌生物活性資源。A.內(nèi)生真菌J-53拮抗紋枯病菌;B.內(nèi)生真菌f-55和f-166拮抗惡苗病Dualculturebetweenendophytesandpathogens3討論從近年來(lái)的研究看，植物體中存在內(nèi)生真菌是普遍的。內(nèi)生菌系統(tǒng)地分布于植物體根、莖、葉、花、果實(shí)和種子等器官、組織的細(xì)胞或細(xì)胞間隙。有報(bào)道說(shuō)，內(nèi)生真菌菌絲在宿主植物的葉鞘和種子中含量最多，而葉片和根中含量極少［9］。但是也有報(bào)道，根和葉內(nèi)生真菌含量較多［10］。不同的植物可能具有的內(nèi)生真菌的種類(lèi)和數(shù)目相差很大。我們從中藥植物小連翹的根、莖、葉共分離出81株內(nèi)生真菌，分屬于4個(gè)目，5個(gè)科，26個(gè)屬。頭孢霉屬（Cephalosporiumsp.）在小連翹根、莖、葉內(nèi)生真菌的分離過(guò)程中都得到，它既是葉內(nèi)的優(yōu)勢(shì)菌群也是整個(gè)植物的優(yōu)勢(shì)菌群；絲核菌屬（Rhizoctoniasp.）分離獲得的數(shù)量比較多，但是它僅僅是根內(nèi)的優(yōu)勢(shì)菌群。植物內(nèi)生真菌生活在活體植物組織中，其生長(zhǎng)代謝受多方面因素制約，不僅受到宿主植物的影響，外界環(huán)境因子也是其重要影響因素。外界環(huán)境變化直接影響植物生長(zhǎng)代謝，間接影響到植物內(nèi)生菌生物多樣性與生長(zhǎng)代謝。從小連翹的根、莖、葉不同部位分離的內(nèi)生真菌在數(shù)量、種類(lèi)有很大的差異。小連翹的大部分內(nèi)生真菌主要存在于葉和根部，而莖中相對(duì)很少，這表明不同的內(nèi)生菌在植物不同器官和組織中占據(jù)不同的生態(tài)位。其原因可能是由于不同部位的微環(huán)境如通氣狀況、生物酶和其他化學(xué)成分的不同，從而適合不同種屬的內(nèi)生真菌類(lèi)群的侵入和生長(zhǎng)。迄今的研究表明，植物內(nèi)生菌與宿主發(fā)生聯(lián)系時(shí)，對(duì)宿主有以下影響：可增強(qiáng)宿主的抗病性、提高植物的生產(chǎn)力［11］、抗逆抗蟲(chóng)［12］、具有除草劑活性［13］等。內(nèi)生真菌對(duì)宿主的作用機(jī)制可能是由于內(nèi)生菌在植物體內(nèi)繁殖和生長(zhǎng)，并產(chǎn)生豐富多樣具有生物活性的次生代謝產(chǎn)物，從而在一定程度上調(diào)節(jié)植物的生長(zhǎng)和代謝。通過(guò)對(duì)峙試驗(yàn)研究小連翹內(nèi)生真菌對(duì)紋枯病菌、白葉枯病菌、惡苗病菌和棉花枯萎病菌等植物病原菌的拮抗性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，小連翹內(nèi)生真菌中多數(shù)種類(lèi)（約52.48%）能夠抑制一種或者多種病原菌的生長(zhǎng)，這表明小連翹內(nèi)生真菌中存在著廣泛的抗菌生物活性資源，這些內(nèi)生真菌及其代謝產(chǎn)物在植物對(duì)抗病原菌的過(guò)程中占有一定的地位。由此可見(jiàn)，藥用植物內(nèi)存在著廣泛的內(nèi)生真菌，這些內(nèi)生真菌可能成為生物防治中有潛力的生物因子，在生態(tài)農(nóng)業(yè)和生物農(nóng)藥研制方面具有重要的用途。研究?jī)?nèi)生真菌的各種次生代謝產(chǎn)物及其作用機(jī)制，在農(nóng)業(yè)和（或）醫(yī)藥業(yè)中具有重要的應(yīng)用潛力。研究和開(kāi)發(fā)植物內(nèi)生真菌，從而為尋找植物病害的抗菌藥用資源提供了一條新的途徑。【參考文獻(xiàn)】［1］謝宗萬(wàn).全國(guó)中草藥匯編下冊(cè)［M］.2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,1996:34-35;72;263;388-389;479-480.［2］段靜雨，阮金蘭.小連翹化學(xué)成分研究［J］.中草藥,2005,26(10):1461-1463.［3］潘映紅,郭寶林,彭勇.國(guó)產(chǎn)金絲桃屬植物資源現(xiàn)狀及利用前景［J］.中藥材,1993,16(3):14-18.［4］BILIAAR,GALLORIS,VINCIERIFFST.John’swortanddepressionefficacy,safetyandtolerabilityanupdate［J］.LifeSciences,2002,70:3077–3096.［5］萬(wàn)德光,裴瑾,周明眉,等.三種貫葉連翹組植物醇提物對(duì)小鼠抗抑郁作用［J］.中藥材,2003,26(3):187-189.［6］王澤劍,梁翠玲,毛志銘.圣約翰草提取物的臨床研究進(jìn)展［J］.國(guó)外醫(yī)學(xué):腦血管疾病分冊(cè),2003,11(3):212-214.［7］吳芳婷,陳代杰,錢(qián)秀萍.植物內(nèi)生菌抗菌物質(zhì)研究新進(jìn)展(英文)［J］.中國(guó)抗生素雜志,2004,29(3):184-192.［8］魏景超.真菌鑒定手冊(cè)［M］.上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社,1982:129-649.［9］李能章,彭遠(yuǎn)義.植物內(nèi)生菌研究進(jìn)展［J］.生物技術(shù),2004,14(2):69-71.［10］李治瀅,李紹蘭,周斌,等.三種藥用植物內(nèi)生真菌抗真菌活性的研究［J］.微生物學(xué)雜志,2004,24(6):35-46.［11］SHINIZUM,FURUMAIT,IGARASHIY,etal.AssociationofinduceddiseaseresistanceofrhododendronseedingswithinoculationofStreptomycesssp.,R-5andtreatmentwithactionmyceteDandamphotericinBtothetissueculturemedium［J］.TheJournalofAntibiotics,2001,54(6):501-505.［12］CLAYK,HOLAHJ.Fungalendophytesymbiosisandplanteddiversityinsuccessionalfields［J］.Science,1999,285:1742-1745.［13］PETERSS,DRAEGERS,AUSTHJ,etal.Interactionsindualculturesofendophyticfungiwithhostandnonhostplantcalli［J］.Mycologia,1998,90:360-367